تاثیر akkermansia muciniphila و وزیکول‌های غشای خارجی حاصل از آن بر بیان microrna های دخیل در بلوغ سلول‌های دندریتیک انسانی مشتق از مونوسیت

باکتری akkermansia muciniphila، یکی از اعضای مهم میکروبیوتای دستگاه گوارش است که بر عملکرد سیستم ایمنی میزبان نقش دارد. هدف از مطالعه حاضر، بررسی تاثیر muciniphila a. و omvهای آن بر بیان mir-21 و  mir-34a دخیل در بلوغ سلول‌های دندرتیک انسانی بود. برای این منظور، باکتری a.muciniphila برروی یک محیط حاوی موسین کشت داده شد و omvs آن توسط اولتراسانتریفیوژ استخراج شد. استخراج سلول‌های تک هسته‌ای خون محیطی (pbmcs)، با استفاده از محلول فایلکول انجام شد. سلول‌های مونوسیت در حضور سایتوکین‏های اینترلوکین4 و فاکتور محرک کلونی گرانولوسیت مونوسیت به سلول‌های دندریتیک، تمایز داده شدند سلول‌های تمایز داده شده، با a. muciniphila (mois، 50 moi100) ، omvs (50µg/µl) ، دگزامتازون (جهت القای سلول‌های دندریتیک تولرژنیک (tol-dc)) و lps اشرشیاکلی (جهت القای سلول‌های دندریتیک بالغ (mature)) تیمار شدند. در نهایت، بیان microrna-21 و microrna-34a بروش real-time pcr اندازه گیری شد. خصوصیات مورفولوژیکی omvs های استخراج شده نشان داد که سایز آنها بین  200-20nm بود. در تیمار lps نسبت به گروه‌های دگزامتازون، a.muciniphila ، omv ها زوائد سیتوپلاسمی بلندتری وجود داشت. بیان microrna-21 در گروه lps نسبت به گروه‌های دگزامتازون، a.muciniphila و omv کاهش داشت. اما این کاهش معنی‌دار نبود (p>0.05). به علاوه، بیان microrna-34a نیز در گروه lps افزایش معنی‌داری داشت که تیمار با دگزامتازون، a.muciniphila و omv این اثر را معکوس کرد (p<0.001). بر طبق نتایج به‌دست آمده از این مطالعه، mir-21 و mir-34a می‌توانند عملکرد ضد التهابی و التهابی از خود بروز دهند. به نظر می‌رسد a.muciniphila و omvs حاصل از آن گزینه مناسبی برای معرفی به‌عنوان پروبیوتیک نسل جدید می‌باشند.

the effect of akkermansia muciniphila and its outer membrane vesicles on the expression of micrornas involved in the maturation of monocyte-derived human dendritic cells

akkermansia muciniphila, an important member of the gastrointestinal microbiota, is involved in the functioning of the host immune system. we aimed to investigate the effect of a. muciniphila and its omvs on the expression of microrna-21 and microrna-34a involved in the maturation of human dendritic cells. a. muciniphila was cultured on a mucin-containing medium and its omvs were extracted by ultracentrifugation. extraction of peripheral blood mononuclear cells (pbmcs) was performed using ficoll’s density gradient centrifugation method. monocytes were differentiated into dendritic cells in the presence of interleukin-4 cytokines and granulocyte-monocyte colony-stimulating factor. then, a. muciniphila at moi 50 and 100, omvs at a dose of 50 μg/μl, dexamethasone (to induce tolerogenic dendritic cells), and the lps (to induce mature dendritic cells) were incubated. finally, the expression of microrna-21 and microrna-34a was measured by real-time pcr. the morphological characteristics of the extracted omvs showed that their size was between 20-200 nm. in lps treatment, there were longer cytoplasmic growths than omvs of dexamethasone and a. muciniphila groups. microrna-21 expression was decreased in the lps group compared to dexamethasone, a. muciniphila, and omv groups, although this decrease was not significant (p> 0.05). in addition, microrna-34a expression was significantly increased in the lps group, which was reversed by treatment with dexamethasone, a. muciniphila, and omv (p <0.001). microrna-21 and microrna-34a can exhibit anti-inflammatory and pro-inflammatory functions. a. muciniphila and its omvs appear to be a viable option for introduction as a new generation probiotic.