تولید دو قارچ بیمارگر حشرات، metarhizium anisopliae و beauveria bassiana، با استفاده از روش تخمیر دو مرحله‌ای

هدف از این تحقیق، تولید آزمایشگاهی دو سویة کارآمد و بومی، metarhizium anisopliae var. acridum  و beauveria bassiana z1  ، با استفاده از روش تخمیر دو مرحله ای با کاربرد بسترهای جامد (گندم، برنج پخته، جو، سورگوم و سبوس گندم) به دنبال بستر مایع (آب پنیر) در دمای 25 درجه سلسیوس بود. حداکثر کنیدی‌های غوطه‌ور به طور معنی‌دار در 50 میلی‌لیتر آب پنیر در مقایسه با محیط کشت مایع دکستروز آگار تولید شد. سپس، بسترهای جامد توسط کنیدی‌های غوطه ور بدست آمده از آب پنیر تلقیح شدند. پس از 14 روز، یک گرم از هر بستر جامد در 100 میلی لیتر توئین غوطه ور شد. بیشترین میانگین تعداد کنیدی‌های m. anisopliae در یک میلی‌لیتر از بستر برنج (105×2.42±107×1.08) و سبوس گندم (105×1.86±107×1.06) بدون تفاوت معنی‌دار به دست آمد. درصد زنده‌مانی برای تمامی بسترهای جامد به استثنای سورگوم (98.90 درصد) 100 درصد بود. بیشترین تعداد کنیدی تولید‌شده توسط قارچ b. bassiana روی بستر سبوس گندم مشاهد‌ه شد (105×1.09±106×5.14 کنیدی در میلی‌لیتر). کار با گندم که 104×3.71±106×4.30 کنیدی در میلی‌لیتر تولید ‌کرد، بسیار آسان‌تر از سبوس گندم بود. در بستر جو کمترین درصد زنده مانی (39.20 درصد) مشاهده شد. تعداد کنیدی‌ها در یک گرم از قارچ m. anisopliae حاصل از الک‌کردن بستر برنج و قارچ b. bassiana حاصل الک‌کردن بستر گندم، به ترتیب 1010 × 2.85 و 1010× 3.09 کنیدی بود. نتایج نشان‌داد که روش دو مرحله‌ای با استفاده از آب پنیر با غلظت استفاده‌شده، در مورد هر دو جدایه موفقیت‌آمیز بود و میزان مناسبی از کنیدی هر دو جدایه را در مرحلة تخمیر جامد تولید کرد.

mass production of two entomopathogenic fungi metarhizium anisopliae and beauveria bassiana using diphasic fermentation

the aim of this research was the laboratory production of two efficient and native strains, metarhizium anisopliae var. acridum and beauveria bassiana z1, using a diphasic fermentation method using solid substrates (wheat, cooked rice, barley, sorghum and wheat bran) followed by a liquid substrate (whey) at 25 ºc. the maximum number of submerged conidia was significantly produced in 50 ml whey compared to dextrose agar liquid medium. the solid substrates were then inoculated by submerged conidia obtained from whey. after 14 days, 1 gram of each solid substrate was immersed in 100 ml of tween. the highest average number of aerial conidia of m. anisopliae in one ml was obtained in rice substrate (1.08×107±2.42×105) and wheat bran (1.06×107 ±1.86×105) without any significant difference. the survival percentage was 100% for all solid substrates except sorghum (98.90%). the highest number of conidia produced by b. bassiana was observed on the wheat bran (5.14×106 conidia/ml). however, it was much easier to handle the wheat, which produced 4.30 × 106 ± 3.71 × 104 conidia per ml, than wheat bran for mass production of b. bassiana. the lowest percentage of survival (39.20%) was observed in barley. the number of conidia in one gram of m. anisopliae obtained by sieving rice and b. bassiana obtained by sieving wheat was 2.85×1010 and 3.09×1010 conidia, respectively. the results clarified that the diphasic method using whey with the applied concentration was successful for both strains and produced an appropriate amount in the solid fermentation phase.