بررسی تکثیر آستروسیت‏های جدا شده از قشر مغز موش صحرایی در یک داربست نانوپپتید

مقدمه: آستروسیت ها فراوان ترین سلول ها در مغز پستانداران هستند و نقش مهمی در تنظیم پیام رسانی عصبی، حفاظت سلول های عصبی و تعیین سرنوشت پیش سازهای عصبی ایفاء می کنند. آستروسیت ها یکی از بهترین نامزدها برای سلول درمانی می باشد. داربست های سه بعدی یک ماتریکس سنتتیک هستند که یک محیط سه بعدی زیست سازگار، زیست تخریب پذیر و غیر سمی برای انواع سلول ها فراهم می کنند. در مطالعۀ حاضر ما آستروسیت ها را از قشر مغز موش صحرایی جدا کردیم و سرعت تکثیر آستروسیت ها در محیط سه بعدی ارزیابی شد. مواد و روش ها: آستروسیت ها از قشر مغز موش صحرایی بالغ جدا شد. سلول های جدا شده در محیط کشت dmem/f12 حاوی 10 درصد fbs کشت داده شدند. آستروسیت های ارزیابی شده با ایمونوسیتوشیمی با بیان پروتئین اسیدی رشته ای گلیال تایید شدند. بعد از پاساژ سوم، آستروسیت ها در محیط های سه بعدی و دو بعدی کشت داده شدند و روش mts به منظور مشخص کردن تکثیر سلولی استفاده شد. یافته ها: بیان نشانگر پروتئین اسیدی رشته ای گلیال توسط روش ایمونوسیتوشیمی تایید شد. نتایج ما نشان داد که کشت سطحی آستروسیت ها در پوراماتریکس 0/15% به طور معنی داری تکثیر سلولی بیشتری را در مقایسه با محیط دو بعدی نشان می دهد. نتیجه گیری: این یافته ها پتانسیل آستروسیت های کشت داده شده در محیط سه بعدی را برای استفاده در پیوند سلول نشان داد.

Proliferation Assay of Astrocytes Isolated from Rat Neocortex in a Nanopeptide Scaffold

Introduction: Astrocytes are the most abundant cells in the mammalian brain and play important roles in regulating neuronal signaling, protecting neurons, and determining the fate of neural precursors. Astrocytes are one of the best candidates for cell therapy. Threedimensional (3D) scaffolds are a synthetic matrix which provided a biocompatible, biodegradable, and nontoxic 3D environment for a variety of cells. In the present study, we isolated astrocytes from rat neocortex and assessed the proliferation rate of astrocytes in 3D dimensional environment. Materials and Methods: Astrocytes isolated from adult rat neocortex. The isolated cells was cultured in DMEM/F12 medium supplement with 10% FBS. Astrocytes were confirmed by expression of GFAP (glial fibrillary acidic protein), assessed by immunocytochemistry. After the 3th passage, the astrocytes were cultured in 3D and two dimensional (2D) cultures and MTS assay was used to determined cell proliferation. Results: The expression of GFAP marker was confirmed by immunocytochemistry assay. Our results showed that surface plating of astrocytes with 0.15% Pura Matrix showed significantly greater cell proliferation in comparison with 2D culture. Conclusion: These findings indicate the potential of the astrocytes which was cultured in 3D for using in cell transplantation.