بررسی روند تکوین Pgc در جنین و لارو ماهی Huso Huso

در ماهیان خاویاری سلول های زایای اولیه از نیمکره گیاهی سلول تخم منشاء گرفته و به ستیغ‌ های تناسلی در حال نمو مهاجرت میکنند و در نهایت گامت ها را تولید می کنند. در مطالعه حاضر سلول‌های زایای بدوی در لارو ماهی huso huso ، طی دو مرحله قبل و بعد از جذب کیسه زرده، به روش هضم آنزیمی جداسازی شده و در دو محیط کشت متفاوت dmem و l15 به مدت سه هفته کشت داده شدند. تعداد و قطر کلونی ها در دو محیط کشت مختلف با یکدیگر مقایسه شد.  بیان ژنهای nanos و vasa طی روزهای مختلف با روش qpcr سنجش شد. برای حفظ ژنوم و نگهداری طولانی مدت سلول‌های زایا، انجماد با استفاده از دو محافظ سرمایی dmso و اتیلن گلیکول انجام گرفت. نتایج نشان داد، تعداد و قطر کلونی‌ها در گروه بعد از جذب کیسه زرده در هر دو محیط کشت افزایش می‌یابد. در حضور dmso زنده مانی سلول‌ها پس از ذوب نسبت به اتیلن گلیکول افزایش قابل ملاحظه‌ای می‌یابد. با در نظر گرفتن چرخه تولیدمثلی طولانی این ماهیان، با تکثیر و شناسایی موفق این سلول‌ها می توان در آینده از آن‌ها برای پیوند به داخل گناد گونه‌های دارای دوره تولیدمثلی کوتاه استفاده کرد.

an investigation of primordial germ cell development in embryo and larvae of huso huso

in sturgeons, primordial germ cells originate from the vegetal pole of the egg. they migrate toward genital ridges during developmental stages and finally differentiate into gametes (the only cells that transmit genetic information). in this study, the cells were isolated from the place of migration of primordial germ cells in huso huso’s larvae during two stages before and after absorption of the yolk sac by enzymatic digestion. the obtained cell suspensions were cultured for three weeks in l15 and dmem medium. the number and diameter of colonies were compared in two culture systems. expression of nanos and vasa genes was measured during different days of culture by qpcr method. to preserve pgcs for a long time, cryopreservation was operated by dimethyl sulfoxide and ethylene glycol. the results showed that the number and diameter of colonies increased in the group after absorbing yolk sac in both l15 and dmem medium. the chance of survival for the cells after melting was significantly higher in the presence of dmso rather than presence of eg. given the long reproductive cycle and the long time it takes to reach sexual maturity, this method can be used to transplant cultured pgcs into the gonad of species with a short reproductive cycle.