بررسی فعالیت زیستی کیس‌پپتین‌ ماهی قرمز بعد از افزودن گروه استیل به باقیمانده تیروزین انتهای آمینی

در مطالعه حاضر، کیس‌پپتین-1 ماهی قرمز با استفاده از روش سنتز فاز جامد و بر اساس به توالی ژن کیس-1 ماهی قرمز (carassius auratus  سنتز شد. سپس جهت بهبود فعالیت زیستی، گروه استیل به باقیمانده تیروزین انتهای آمینی اضافه شد. پپتید سنتز شده (موسوم به ackiss1) به روش rp-hplc خالص‌سازی و ساختمان آن با استفاده از طیف سنجی جرمی esi تایید شد. جهت تعیین فعالیت زیستی، پپتید ackiss1، کیس‌پپتین‌ طبیعی (kiss1) و هورمون gnrh تجاری رایج به ماهی قرمز تزریق شده و برخی از پارامترهای مهم فیزیولوژی تولیدمثل این ماهی مورد مطالعه قرار گرفت.  ackiss1 و kiss1 با دوز 100 میکروگرم بر کیلوگرم وزن بدن ماهی و هورمون gnrh با دوزهای 100 و 200 میکروگرم بر کیلوگرم وزن بدن تزریق شدند. 6 ساعت بعد از تزریق خون‌گیری انجام شد و هورمون‌های جنسی در پلاسما اندازه‌گیری شدند. 24 ساعت بعد از تزریق در یک گروه از ماهی‌ها شاخص‌های تولیدمثلی اندازه‌گیری شد. در گروه دیگری از ماهی‌ها 24 ساعت بعد تزریق بافت تخمدان و مغز برای مطالعات بافت‌شناسی و بیان ژن‌های (cyp19b، gpr54a و kiss1) جدا گردید. نتایج نشان داد که تغییرات قابل‌توجهی در پارامترهای بیوشیمیایی رخ داده است. همچنین، بیان ژن‌های kiss1، cyp19b و gpr54a در نمونه های بافت مغز و هم در بافت تخمدان در تیمار ackiss1  نسبت به تیمار kiss1 افزایش قابل توجهی را نشان داد. همچنین در بافت‌شناسی تخمدان مشخص شد که تحت تاثیر کیس‌پپتین و gnrh تعداد اووسیت‌های رسیده به‌صورت معنی‌داری افزایش پیدا کرده است.

investigation of the biological activity of caspian kutum kisspeptin after adding an acetyl group to tyr1

in the present study, the goldfish kisspeptin peptide was synthesized using the solid phase synthesis method according to the nucleotide sequence of the goldfish (carassius auratus) kiss1 gene. next, an acetyl group was added to the amino group of tyr1 to increase the biological activity. the synthesized peptide (referred to as ackiss1) was purified by rp-hplc and its structure was confirmed using electrospray ionization (esi) mass spectrometry. to determine the biological activity, ackiss1, native kiss1 and commercial gnrh hormone were injected to goldfish, some important parameters of the reproductive physiology were studied. kiss1 and ackiss1 were injected with a dosage of 100 μg/kg fish body weight and gnrh was injected with dosages of 100 and 200 μg/kg body weight. 6 hours after injection, blood was taken from the caudal vein and sex hormones were measured in plasma. 24 hours after injection, reproductive indices were measured in a series of fish. in another series of fish, 24 hours after injection, ovarian and brain tissues were separated for histological studies and expression of the reproductive-related genes (cyp19b, gpr54a, and kiss1). the results revealed that significant changes in biochemical parameters and gene expression were recorded in both brain tissue samples and ovarian tissue in ackiss1 treatment. it was also found in ovarian histology that under the influence of kisspeptin and gnrh, the number of mature oocytes increased significantly.