تغییرات بیانی ژن‌های کلاژن І و Ііі در سلول‌های فیبروبلاست پوست انسان در اثر عصاره ریزجلبک Chlorella Vulgaris و مقایسه آن با ویتامین C

پیری پوست یک فرآیند بیولوژیک ناشی از کاهش تولید کلاژن و نیز افزایش آنزیم های متعدد شامل ماتریکس متالوپروتئینازها (mmps) بوده که این آنزیم ها نیز باعث تخریب کلاژن می‌شوند. chlorella vulgaris یک ریز جلبک دریایی می‌باشد و اثرات مفیدش بر پوست، آن را به یک ماده مناسب برای استفاده در محصولات ضد پیری تبدیل کرده است. در این پژوهش، تاثیر عصاره جلبک c. vulgaris در تولید کلاژن نوع і و ііі در مقایسه با ویتامین c در سلول‌های فیبروبلاست پوست (hu02) در مرکز ملی ذخایر ژنتیکی و زیستی ایران در شهریور 1397 بررسی شد. عصاره گیری از جلبک به روش اولتراسونیک و هیدرولیز آنزیمی انجام و عصاره حاصل در غلظت های مختلف برای تاثیر آن بر بیان ژن کلاژن های نوع і وііі بر سلول‌های hu02 اثر داده شد. در ابتدا اثر سمیت سلولی آن بر سلول آزمایش و با تست mtt مشخص شد که عصاره فاقد اثر سمی برای سلول‌های hu02 است. همچنین با استفاده از qrtpcr تایید شد که عصاره باعث افزایش بیان ژن کلاژن نوع і و ііі در مقایسه با گروه کنترل می‌شود. عصاره جلبک و ویتامین c با درصد زنده‌مانی (viability) یکسان (97 درصد) برای تعیین تاثیر عصاره بر بیان ژن های کلاژن і و ііі در مقایسه با ویتامین c استفاده شد. عصاره جلبک و ویتامین c باعث افزایش بیان ژن کلاژن نوع і به ترتیب به میزان 3.14 برابر و 1.42 برابر شدند. عصاره جلبک تاثیر بیشتری در مقایسه با ویتامین c بر بیان ژن کلاژن نوع і و ویتامین c تاثیر بیشتری در افزایش بیان ژن کلاژن نوع ііі در مقایسه با عصاره جلبک داشت و باعث افزایش بیان این ژن به میزان 2.12 برابر شد. درحالی‌که این مقدار برای عصاره 1.14 برابر بود. این یافته‌ ها نشان داد که عصاره جلبک c. vulgaris و ویتامین c باعث تحریک سنتز کلاژن در سلول های hu02 می شوند و می توانند جایگزین مناسب برای انواع مواد شیمیایی مضری باشند که برای کلاژن سازی در پوست استفاده می شوند.

Gene expression changes of collagen І and ІІІ in human skin fibroblast cells in effect of microalga Chlorella vulgaris extract and compared to vitamin C

Skin aging is a biological process that is due to the reduction of collagen production and increase of multiple enzymes, including matrix metalloproteinase (MMPS), which degrade collagen. Chlorella vulgaris is a marine microalga and its beneficial effects on the skin make it a proper ingredient to be used in antiaging products. In this study, the effect of C. vulgaris extract comparing to vitamin C on types І and ІІІ collagen production in the human cell line Hu02 was investigated at the Iranian Biological Resource Center in September 2018. Chlorella was extracted using ultrasonication plus enzymatic hydrolysis, and Chlorella extract at different concentration was investigated for its effect on gene expression of collagen І and ІІІ in Hu02 cells. First, it was investigated whether alga extract induced cytotoxicity in Hu02 cells. MTT assay showed that extract was nontoxic to Hu02 cells. Using quantitative PCR, it was confirmed that extract increased the gene expression of types І and ІІІ collagen, comparing to the control group. Chlorella extract and vitamin C with a similar viability (97%) was used to investigate the effect of extract on gene expression of types І and ІІІ collagen, compared to vitamin C. Extract and vitamin C increased gene expression of type І collagen 3.14fold and 1.42fold, respectively. Alga extract had more effect on gene expression of type І collagen, compared to the vitamin C and vitamin C had more effect on gene expression of type ІІІ collagen, compared to the alga extract and increased its expression 2.12fold, whereas this amount for the extract was 1.14 fold. These findings indicated that C. vulgaris extract and vitamin C induces collagen synthesis in Hu02 cells and could be proper alternative ingredients to the harmful chemicals used to make skin collagen.