مطالعات سینتیکی آنزیم پراکسیداز در حضور حلال‌های آلی اتانول و بوتاندیول

پراکسیدازها (ec.1.11.1.7) گروهی از آنزیم‌های اکسید و ردوکتازها هستند که توسط تعدادی از میکروارگانیسم‌ها و گیاهان تولید می‌شوند و احیای پراکسیدها را کاتالیز می‌کنند. پراکسیدازها به‌طور وسیعی در بیوشیمی بالینی و آزمایشات ایمنی‌شناسی آنزیمی استفاده می‌شوند. ایزوآنزیم c پراکسیداز ترب کوهی (hrpc) یکی از متداول‌ترین پراکسیدازهای شناخته شده است ساختار این آنزیم به‌طور غالب دارای مارپیچ آلفا است. مطالعات سینتیکی آنزیم پراکسیداز با استفاده از دستگاه اسپکتروفتومتر uvvis مجهز به سیستم کنترل الکترونیکی در دمای °c35 و °c45 و در 4 ph و در حضور اتانول و بوتاندیول انجام گرفت. بررسی پارامترهای سینتیکی نشان می‌دهند که حلال‌های آلی اتانول و بوتاندیول باعث افزایش سرعت ماکسیمم (vmax) و فعالیت آنزیم پراکسیداز می‌شوند. حلال‌های آلی بر میان کنش‌های الکتروستاتیک پروتئین‌ها اثر می‌گذارند چرا که ثابت دی الکتریک آن‌ها با آب متفاوت است. به‌طور کلی کاهش خاصیت قطبی حلال و کاهش ثابت دی‌الکتریک سبب افزایش دافعه الکتروستاتیک شده و منجر به باز شدن پروتئین‌ها می‌شود. فعالیت آنزیم‌ها در چنین محیط‌های آلی باعث افزایش پایداری، فعالیت یا تسهیل واکنش‌هایی می‌شود که در محیط‌های آبی به سختی انجام می‌شود.

Kinetics studies of peroxidase enzyme in the presence of organic solvents ethanol and butanediol

Abstract Peroxidases are a group of oxidoreductases that are produced by a number of microorganisms and plants, and catalyse the reduction of peroxides. Peroxidases are widely used in clinical biochemistry and enzyme immunoassay. Horseradish peroxidase isoenzyme C (HRP) is one of the characterized peroxidases. The structure of the enzyme is largely alpha helical. Kinetics studies of peroxidase enzyme were performed using a spectrophotometer UVVis fitted with electronic control system at 35oC and 45oC and pH4 and in the presence ethanol and butanediol. Kinetic parameters show that ethanol and butanediol organic solvents becomes caused the increase of maximum speed (VMAX) and activity of the enzyme. Organic solvents have effect on electrostatic interactions of proteins because their dielectric constant with water is different. In general, reduce properties of polar solvents and decreased dielectric constant becomes caused the increases electrostatic repulsion, leading to the opening of the proteins. Enzymes activity in such organic environments increases stability, activity or facilitate reactions that are difficult to perform in aquatic environments.