بررسی تاثیر آسکوربیک اسید بر زیستایی سلول‌‌های بنیادی مزانشیمی کشت ‏شده بر روی داربست ‏سلول‌زدایی‌شده عضله اسکلتی

مهندسی بافت رشته ای نوظهور است که بر سه عنصر سلول، داربست و مولکول های زیستی فعال استوار بوده و می تواند برای درمان آسیب های عضلانی مفید باشد. هدف از این مطالعه، بررسی تاثیر آسکوربیک اسید (aa) بر زیستایی سلول‌های بنیادی مزانشیمیِ مغز استخوانِ (bm-mscs) کشت شده بر روی داربستِ سلول زدایی شده عضله اسکلتی می‌باشد. ابتدا bm-msc از مغز استخوان پای رت استخراج و کشت شده و هویت سلول‌ها با استفاده از فلوسایتومتری بررسی شد. همچنین عضله اسکلتی پای رت، استخراج گردیده و با استفاده از محلول %1 sds سلول زدایی انجام شد. برای اطمینان از سلول زدایی، رنگ آمیزی های اختصاصی ماسون تریکروم، آلسیان بلو و dapi انجام شد. سپس bm-mscs روی داربست های سلول زدایی شده کشت شدند و با aa یک میلی مولار به مدت 2 روز تیمار شدند. سپس با استفاده از میکروسکوپ الکترونی روبشی (sem) و روش mtt به ترتیب بقاء و میزان زیستایی سلول‌ها بررسی شد. bm-mscs مورفولوژی دوکی داشته و نتایج فلوسایتومتری نشان دهنده بیان   cd44 وcd90  و نیز عدم بیان cd45 و cd34 در بیش از 90 درصد سلول‌ها بود. رنگ آمیزی های اختصاصی حفظ کلاژن و گلیکوزآمینوگلیکان ها و عدم حضور dna را در بافت سلول زدایی شده اثبات کردند. نتایج mtt  نشان داد که aa به طور معنی داری باعث افزایش زیستایی bm-mscs می شود (0.05>p). همچنین نتایج sem نشان داد که سلول‌ها در گروه تیمار شده با aa، گسترش بیشتری داشتند. بطور کلی، aa می تواند با افزایش زیستایی bm-mscs، بازده مهندسی بافت عضله را بهبود بخشد.

investigating the effect of ascorbic acid on the viability of ‎mesenchymal ‎stem cell cultured on the skeletal muscle ‎decellularized scaffold

tissue engineering is an emerging field based on the three elements of cells, scaffolds, and bioactive molecules, and can be a useful method for treating muscle injuries. the aim of this study is to investigate the effect of ascorbic acid (aa) on the viability of bone marrow mesenchymal stem cells (bm-mscs) cultured on skeletal muscle decellularization scaffold. first, bm-mscs were extracted from rat leg bone marrow and cultured in vitro. the identity of the cells was assessed using flow cytometry. the extracted rat skeletal muscle was decellularized using a 1% sds solution. the decellularization process was investigated by masson trichrome, and alcian blue and dapi staining.bm-mscs were cultured on decellularized scaffolds and treated with 1 mm aa for 2 days. then, the survival and viability of the cells were evaluated using scanning electron microscope (sem) and mtt methods, respectively.bm-mscs had a spindle morphology, and the results of flow cytometry showed the expression of cd44 and cd90 and the lack of expression of cd45 and cd34 in more than 90% of the cells. the staining verified the preservation of collagen and glycosaminoglycans and the absence of dna in the decellularized tissue. mtt results showed that aa significantly increases the viability of bm-mscs (p<0.05). also, the sem results showed that the cells in the group treated with aa were more proliferated. in general, aa can improve the efficiency of muscle tissue engineering by increasing the viability of bm-mscs.