ژن‌های پلاسمیدی مقاومت به کینولون و ‏تشکیل بیوفیلم در جدایه‌های بالینی ‏اشریشیاکلی

اشرشیاکلی یک باکتری است که سبب بیماری های متعدد در انسان و دام میگردد. این باکتری به‌دلیل افزایش مقاومت به آنتی بیوتیک ها، مشکلات عدیده ای در صنعت دامداری و پزشکی ایجاد کرده است. هدف از این مطالعه تعیین مقاومت به فلوروکینولون ها، شناسایی ژن‌های پلاسمیدی مقاومت به کینولون (pmqr) و تعیین قدرت تشکیل بیوفیلم توسط سویه های اشرشیاکلی جدا شده از نمونه های انسانی و گاوی در همدان می باشد. در این مطالعه توصیفی تحقیقی، تعداد 40 جدایه اشریشیاکلی (20 جدایه انسانی، 20 جدایه گاوی) مورد بررسی قرار گرفت. ابتدا مقاومت جدایه‌ها به سیپروفلوکساسین و لوفلوکساسین با روش میکرودایلوشن براث سنجیده شد و سپس شناسایی ژن‌های مقاومت به فلوروکینولون ها (qnra، qnrb، qnrc، qnrd، qnrs و acc) با روش pcr انجام گرفت. در ادامه توانایی جدایه‌های اشرشیاکلی در تولید بیوفیلم با روش میکر تیتر پلیت و میکروسکوپ الکترونی سنجیده شد و نتایج با استفاده از آزمون مربع کای با نرم‌افزار spss (ورژن 19) مورد آنالیز قرار گرفت نتایج میکرو دایلوشن براث نشان داد که از 40 جدایه اشریشیاکلی، 26 جدایه (65 درصد) به سیپروفلوکساسین و 23 جدایه (57.5 درصد) به لوفلوکساسین مقاوم بود. در بررسی فراوانی ژن‌های pmqr با روش pcr، فراوانی ژن‌های qnra، qnrb، qnrc، qnrd، qnrs و aac به‌ترتیب 45، 47.5، 67.5، 27.5، 60 و 55 درصد گزارش شد. همچنین نتایج میکروتیتر پلیت نشان داد که40 درصد ایزوله ها توانایی تشکیل بیوفیلم قوی را دارند و تنها 4 درصد بیوفیلم تشکیل ندادند. نتایج مطالعه حاضر نشان داد که مکانیسم اصلی مقاومت این جدایه‌ها به فلوروکینولون ها مربوط به ژن‌های pmqr می‌باشد و احتمالاً مصرف بی‌رویه فلوروکینولون ها در عفونت‌های انسانی، منجر به گسترش مقاومت به این داروها در جدایه‌های انسانی نسبت به جدایه‌های گاوی شده است. همچنین تشکیل بیوفیلم در ایجاد مقاومت به فلوروکینولون ها نقش بسزایی داشت.

Evaluation of Plasmid-Mediated ‎Quinolone Resistance Genes and ‎Biofilm Formation in Clinical ‎Isolates of Escherichia coli

Escherichiacoli is an opportunistic pathogenic bacterium that causes numerous diseases in humans and animals.Because of increased resistance to antibiotics, this bacterium has raised many concerns in the livestock industry as well as in medicine. The aim of this study was to determine the resistance to fluoroquinolones, to identify plasmidmediated quinolone resistance (PMQR) genes and to determine the biofilm formation ability of E. coli strains isolated from human and bovine samples in Hamadan.In this descriptive study, 40 isolates of E. coli(20 human isolates, 20 bovine isolates) were studied. First, the resistance of the isolates to ciprofloxacin and levofloxacin was measured by microdilution broth method, and then the identification of fluoroquinolone resistance genes (qnrA, qnrB, qnrC, qnrD, qnrS and acc) was performed by PCR method. In the following, the ability of E. coli isolates to produce biofilm was evaluated by microtiter plate method and the results were analyzed by chisquare test using SPSS software (version 19). Microdilution results showed of 40 E.coli isolates, 26 (65%) were resistant to ciprofloxacin and 23 (57.5%) were found to be resistant to levofloxacin.In PMQR genes frequency analysis by PCR,the qnrA, qnrB, qnrC,qnrD, qnrS and aac genes were detected in 45%, 47.5%, 67.5%, 27.5%, 60% and 55% of the isolates, respectively. Also microtiter plate test results showed that 40% of the isolates were capable of forming strong biofilm and only 4% did not form biofilm.The results of the present study showed that the main mechanism of resistance to fluoroquinolones is related to PMQR genes and possibly excessive use of fluoroquinolones in human infections leads to the development of resistance to these drugs.Biofilm formation has also been shown to be effective in creating fluoroquinolone resistance.