تشخیص انواع مایعات زیستی باقیمانده در صحنۀ جرم به روش بررسی بیان mrna‌های خاص بافتی و انجام واکنش pcr

زمینه و هدف: ترشحات زیستی همچون خون، بزاق و مایع منی جزء فراوان ‌ترین نمونه ‌های کشف شده از صحنۀ جرم می ‌باشند. از این‌‌رو، یکی از ملزومات بررسی صحنۀ جرم، تشخیص به موقع و دقیق این نوع مایعات زیستی در محل وقوع جرم است. هدف از این تحقیق، استفاده از روش‌های مولکولی بر پایۀ پروفایل بیانی mrna جهت بررسی امکان شناسایی مایعات زیستی و ایجاد یک پروتکل مناسب برای انجام آن بود.روش: مایعات زیستی (خون، بزاق و مایع منی) به صورت تازه و خشک شده در ویال و روی کاغذ و در بازه‌های زمانی یک و پنج ماه جمع‌آوری شدند. بعد از انتخاب نشانگرهای مناسب، برای هریک از نمونه‌ های موردنظر، شرایط و پروتکل‌های استخراج rna و pcr برای این نشانگرها بهینه شد. در نهایت، به منظور ارزیابی این روش، نمونه‌ های حقیقی صحنۀ جرم نیز با این روش مورد بررسی قرار گرفتند.یافته ‌ها: نتایج نشان داد که تکنیک‌ها از لحاظ کمی و کیفی جهت فرآیندهای پایین دستی مناسب بوده و حتی پس از پنج ماه می‌توان rna را از سطوح خشک بازیابی و جهت شناسایی مایعات به کار برد.نتیجه ‌گیری: در این تحقیق شرایط استخراج rna و واکنش pcr برای این‌گونه مطالعات بهینه شده و چشم‌اندازی عملی در زمینۀ امکانات، تکنیک ‌ها و هزینۀ انجام کار مورد بررسی قرار گرفت که در نهایت استفاده از پتانسیل پروفایل mrna را به عنوان یک جایگزین احتمالی تست ‌های سرولوژیکی فراهم کند.

Fluids Identification by Expression Analysis of TissueSpecific mRNAs Following PCR

Background and Aim: Human body fluids such as blood, semen and saliva represent the most common source of biological material discover at a crime scene. Hence one of the requirements for a crime scene is the timely and accurate diagnosis of biological fluids at the site of the crime. The purpose of this study was to use molecular methods, based on tissuespecific mRNA expression, in order to determine the possibility of identifying body fluids and creating a practical protocol.Method: Biological fluids (blood, semen and saliva) were collected as fresh and dried in vials and dried on paper at intervals of one and five months. After selecting the appropriate markers for each sample, the conditions and protocols for RNA extraction and PCR conditions for these markers were optimized. This assay was further validated with real casework samples and Crime scene samples.Findings: Our results showed the protocols are appropriate in quantitative and qualitative terms for downstream processes. Also, PCR results confirmed that even after five months, RNA could be recovered from the dry surfaces and used well to detect fluids with PCR.Conclusions: Here, we optimized RNA extraction conditions and PCR for forensic purposes and provided a general and practical outlook on the possibilities, techniques and the cost of doing the work. Eventually the results of this research support the potential use of mRNA profiling as an alternative to conventional serological tests.