تاثیر امواج فراصوت بر زنده‌مانی سلولهای توتون

توتون nicotiana tabacum l.) از چندین دهه گذشته به عنوان یک گیاه مدل برای کشت بافت و مهندسی ژنتیک مورد استفاده قرار می‌گیرد. در این پژوهش، اثر امواج فراصوت بر زنده‌مانی و شکست سلول‌های توتون مورد ارزیابی قرار گرفت. بدین منظور، ریزنمونه‌های برگ گیاه توتون در محیط کشت ms حاوی 5/1 میلی‌گرم بر لیتر 2,4d و یک میلی‌گرم بر لیتر کینتین کشت داده شد تا کالوس تولید کنند. کشت سوسپانسیون سلولی از طریق انتقال کالوس‌های حاصل از ریزنمونه برگ به محیط کشت مایع ایجاد شد. سپس سوسپانسیون سلولی در معرض امواج فراصوت در دما و زمان‌های مختلف قرار گرفته و درصد زنده‌مانی سلول‌ها با استفاده از رنگ‌آمیزی تریپان بلو و تغییرات ساختار و فراساختاری سلول‌ها توسط میکروسکوپ نوری و الکترونی مورد ارزیابی قرار گرفت. نتایج نشان داد که با افزایش مدت زمان تیمار با امواج فراصوت و همچنین دمای اعمال تیمار، درصد زنده‌مانی سلول‌ها به طور معنی‌داری کاهش یافت. بیشترین سطح زنده‌مانی سلول‌ها در دمای 40 درجه سانتی‌گراد و دو دقیقه امواج فراصوت (702/76 درصد) و دمای 25 درجه سانتی‌گراد و زمان دو دقیقه امواج فراصوت (67/75 درصد) بوده است. بیشترین شکست سلولی به ترتیب مربوط به دمای 50 درجه سانتی‌گراد و 14 دقیقه امواج فراصوت (733/18 درصد) و دمای 25 درجه سانتی‌گراد و 20 دقیقه اعمال امواج فراصوت (48/17 درصد) بود. میکروسکوپ الکترونی نگاره (sem) ایجاد حفرات با اندازه مختلف در دیواره سلول بر اثر اعمال امواج فراصوت را نشان داد.