بیان دو سیسترونی ژن‌های رمز کننده آنتی‌بادی مونوکلونال trastuzumab در توتون با استفاده از یک توالی جایگاه میانی ورود ریبوزوم
|
|
|
|
|
|
|
|
نویسنده
|
جعفری مراد ,احساسات وطن مریم
|
|
منبع
|
پژوهشهاي سلولي و ملكولي - 1395 - دوره : 29 - شماره : 2 - صفحه:153 -169
|
|
چکیده
|
آنتی‌بادی‌های مونوکلونال هترودایمرهای متشکل از چهار زنجیره پپتیدی، دو زنجیره سبک (l) یکسان و دو زنجیره سنگین (h) یکسان هستند. بیان همزمان مقدار برابر ژن‌های رمز کننده برای تولید پایدار و گردایش به صورت یک آنتی‌بادی کارکردی ضروری است. به منظور بیان همزمان چندین ژن، سیستم‌های مختلفی از جمله وکتورهای مبتنی بر جایگاه میانی ورود ریبوزوم (ires) توسعه یافته‌اند. در مطالعه حاضر، یک حامل دی‌سیسترونیک برای بیان همزمان ژن‌های رمز کننده زنجیره‌های سنگین و سبک آنتی‌بادی ضد سرطان سینه trastuzumab (herceptin®) با استفاده از توالی ires از فاکتور پروتئین شوک حرارتی1 nicotiana tabacum (nthsf1) ساخته شد. کارایی دستواره در nicotina tabacum به روش آگرواینفیلتراسیون ارزیابی شد. بیان دی‌سیسترونیک تراژن‌ها در سطح رونوشت rna با آنالیز rtpcr نیمه کمّی مشخص شد. آنالیز وسترن بلات بیان کارآمد فرم تترامر trastuzumab را در بافت برگی توتون مورد تایید قرار داد و محتوی آنتی‌بادی 7 روز پس از اینفیلتراسیون 44/0 درصد پروتئین کل محلول برآورد شد. نتایج مطالعه حاضر نشان دهنده کارایی عناصر ires گیاهی برای بیان دی‌سیسترونیک پروتئین‌های هترومولتی‌مر در گیاهان است.
|
|
کلیدواژه
|
آنتی‌بادی مونوکلونال trastuzumab، بیان دو سیسترونی، فاکتور شوک حرارتی-1 توتون، جایگاه میانی ورود ریبوزوم (ires)
|
|
آدرس
|
دانشگاه ارومیه, دانشکده کشاورزی، پژوهشکده زیست فناوری, گروه اصلاح و بیوتکنولوژی گیاهی، گروه بیوتکنولوژی کشاورزی, ایران, دانشگاه ارومیه, دانشکده کشاورزی, گروه اصلاح و بیوتکنولوژی گیاهی, ایران
|
|
پست الکترونیکی
|
m.ehsasat@gmail.com
|
|
|
|
|
|
|