بررسی مولکولی القا کلروز توسط ژنهای rolc و trolc در گیاه توتون

ژنهای rooting locus) rol) بر روی transferred dna) tdna) باکتری agrobacterium rhizogenes قرار دارند که با انتقال به میزبان گیاهی باعث ایجاد تغییرات مورفولوژیک و رشد و نموی در گیاه می شوند. این تحقیق با هدف بررسی تاثیر ژن rolc از این باکتری و هومولوگ گیاهی آن یعنی ژن trolc از گیاه توتون، بر رشد و نمو گیاه nicotiana tabacum cv.samsun انجام گرفته است. در این تحقیق ابتدا dna گیاهان تراژن rolc و trolc استخراج و از حضور ژنهای مورد نظر اطمینان حاصل شد. با توجه به اینکه گیاهان تراژن با بیان ژنهای rolc وtrolc، فنوتیپ کلروزه نشان می دهند انتظار میرفت که بیان ژنهای کلروپلاستی نیز با بیان تراژنها کاهش یابد. برای بررسی این موضوع، استخراج rna از گیاهان تراژن، سنتز cdna و در نهایت واکنش pcr بر روی نمونه‌ها با پرایمرهای اختصاصی ژن psba کلروپلاستی انجام گرفت. نتایج حاصل از rtpcr نشان داد که بیان ژن فوق که کد کننده یکی از پروتئینهای فتوسیستم ii می باشد در گیاهان تراژن و کلروزه بشدت کاهش یافته یا متوقف میشود و به عبارت دیگر یکی از دلایل ایجاد کلروز ناشی از این تراژنها از نقطه نظر مولکولی میتواند نقص بیان ژن psba در گیاهان بیان کننده ژنهای rolc و trolc باشد.

Study of the effect of rolC and trolC genes on chlorosis in Tobacco plants

The rol (rooting locus) genes are located on TDNA (Transferred DNA) of Agrobacterium rhizogenes and induce the morphological and developmental abnormalities upon the integration in to the plant genome. In this study we investigated the effect of bacterial rolC gene and its homologue in Tobacco tobacco rolC or ''trolC'' gene on growth of Nicociana tabaccum cv.samsun plants. In the first time, the presence of rolC and trolC genes was confirmed in transgenic lines and then using RTPCR technique, we have shown that the transgenic plants expressing the bacterial rolC or tobacco trolC genes which demonstrate the chlorotic phenotype, have very low or no expression of the chloroplastic gene ''psbA''. This gene encodes for one of the proteins of photosystem II. We conclude that the lack of expression of chloroplastic psbA gene and thus the defective feature of chloroplasts in rolC/trolC transgenic plants may cause the chlorotic phenotype of these plants.