بررسی پروتیومیکی گیاهان تراریخت شده باGr-Rbp2 در مقایسه با گیاه وحشی

Gr-rbp2 یکی از 8 عضو خانواده gr-rbp در گیاه آرابیدوپسیس است که پس از ترجمه درمیتوکندری جای می گیرد. مطالعه حاضر به منظور بررسی پروتیومیکی گیاهان تراریخت شده با gr-rbp2 در مقایسه با گیاه وحشی صورت گرفته است. در این مطالعه ژن gr-rbp2 از گیاه آرابیدوپسیس جداسازی و در پلاسمید pbin19 کلون شد. سپس پلاسمید نوترکیب از طریق باکتریagrobacterium tumefaciens و به روش floral dipping به گیاه آرابیدوپسیس انتقال یافت. با انتقال cdna کامل gr-rbp2 بیست و یک لاین به دست آمد. گیاهان تراریخت شده از نظر فنوتیپی و زمان گلدهی تفاوتی را با گیاه وحشی نشان نداده و قادر به تولید بذر بودند. میزان بیان ژن در سه لاین تراریخت شده مختلف و گیاه وحشی تعیین شد. میزانmrna درگیاهان تراریخت شده 2 برابر بیشتر از گیاه وحشی بود. آنالیز پروتیومیکی با استفاده از دو سیستم ژل مختلف صورت گرفت: 2d ief/ sds page و 2d blue-native/sds page. تمام ژلها با نقره رنگ آمیزی شدند. نتایج حاصل از ژل الکتروفورز 2 بعدی نشان داد که پروتیین gr-rbp2 در لاینهای تراریخت شده افزایش بیان داشته است. این نتایج نشان داد که پروتیینهای زنجیره تنفسی در لاینهای تراریخت شده مورد بررسی و گیاه وحشی به فراوانی وجود دارد. کمپلکس v زنجیره تنفسی (کمپلکس (f1 تا حدودی تخریب شده بود اما این امردر تمام لاینهای تراریخت شده و گیاه وحشی مشابه بود. آنالیز طیفهای ms به شناسایی 110 لکه پروتیینی منجر شد که 6 لکه پروتیینی در لاینهای تراریخت شده در مقایسه با گیاه وحشی افزایش نشان داد. نگاهی به برخی پروتیینهای شناخته شده نشان داد که هیچ تغییرعمده ای که نشاندهنده تحریک یا سرکوب برخی مسیرهای متابولیکی باشد وجود ندارد.