معرفی باکتری های مولد بیودمولسیفایر جدا شده از خاک های آلوده به نفت و سنجش عملکرد آن ها در جداسازی آب از نفت

بیودمولسیفایرها گروهی از ترکیبات بیوسورفاکتانت با توانایی شکست امولسیون هستند که مهم‌ترین کاربردشان در جداسازی آب از نفت خام است. این ترکیبات با توجه به زیست‌سازگاری جایگزین خوبی برای دمولسیفایرهای شیمیایی هستند. هدف از این پژوهش، جداسازی باکتری‌های مولد بیودمولسیفایر و سنجش عملکرد آن‌ها در شکست امولسیون‌های آب از نفت می‌باشد. بدین منظور پس از نمونه برداری، جداسازی اولیه در محیط کشت پایه نمکی، غنی‌سازی در محیط کشت مولرهینتون براث و خالص‌سازی با تکنیک کشت پی‌درپی در محیط کشت مولر هینتون آگار انجام شد. تولید بیوسورفاکتانت توسط جدایه‌ها از طریق روش‌های کیفی مانند بررسی فعالیت همولیتیک، آزمون انهدام قطره، آزمون گسترش نفت و سنجش هیدروفوبیسیته سلولی براساس اندازه‌گیری چسبندگی میکروبی به هیدروکربن‌ها ارزیابی گردید. ماهیت بیودمولسیفایری این ترکیبات و موقعیت آن‌ها در سلول از طریق بررسی میزان شکست امولسیون‌های آب در نفت سفید در آزمون دمولسیفیکاسیون بررسی شد. جدایه‌های مولد بیودمولسیفایر بر اساس آزمون‌های بیوشیمایی وآنزیمی و نیز رنگ آمیزی به عنوان bacillus sp. hs9، staphylococcus sp. hs10، bacillus sp. hs11، bacillus sp. hs12 شناسایی شدند. میزان دمولسیفیکاسیون این جدایه‌ها در شکست امولسیون آب در نفت سفید به ترتیب 3±25، 5±28.57، 1±27.14 و 1±51.57 درصد گزارش شد. از میان جدایه‌ها، جدایه‌ی bacillus sp. hs12 بیشترین درصد دمولسیفیکاسیون را نشان داد. با توجه به توانایی دمولسیفیکاسیون این جدایه‌ها، پیشنهاد می شود با هدف کاربردی شدن جدایه ها از جمله افزایش استحصال نفت و حذف امولسیون های نامطلوب نفتی در صنایع بالادستی، توانایی امولسیون زدایی جدایه ها در نفت خام و شرایط عملکردی کارخانجات نمک زدایی بررسی گردد.

introducing biodemulsifier producing bacteria isolated from oil contaminated soils and measuring their performance in separating water from oil

biodemulsifiers are a group of biosurfactants with emulsion breaking ability and their most important application is separation of water from crude oil. these compounds can be a good substitute for chemical demulsifiers, due to their biocompatibility. the aim of this study was to isolate biodemulsifier producing bacteria and evaluate their performance in demulsifying water in oil emulsions. for this purpose, after sampling, bacterial isolation was made in modified mineral salt medium and purified on mueller-hinton agar. the production of biosurfactant was evaluated through hemolytic activity assay, drop collapse test, oil spreading test and cell hydrophobicity measurements based on microbial adhesion to hydrocarbons. the biodemulsifier activity of these compounds and their position in the cells were investigated by examining the demulsification ratio of water in kerosene emulsions in demulsification tests. based on staining and biochemical and enzymatic tests, these isolates were identified as bacillus sp. hs9, staphylococcus sp. hs10, bacillus sp. hs11, bacillus sp. hs12. the demulsification activity of these isolates in breaking water in kerosene emulsions were 25 ± 3, 28.5 ± 5, 27.14 ± 1, 51.57 ± 1 percent, respectively. among these isolates, bacillus sp. hs12 with 51.57 ± 1 percentage of demulsification activity was selected as the preferred isolate. with regard to demulsification potential of these isolates, it is suggested that their performance be evaluated in crude petroleum and desalting units conditions in order to be applied in enhanced oil recovery and breaking undesirable emulsions in upstream facilities.