جداسازی، توالی یابی و بررسی عناصر تنظیمی ناحیه پروموتوری ژن c3 در ماهی قزل آلا

سیستم کمپلمان از اجزاء اصلی سیستم دفاعی بدن بسیاری از موجودات میباشد. وجود این سیستم در موجودات متعددی تایید شده است اما در مورد مکانیسم های تنظیم بیان آن در سطح ژنومی برخی از موجودات اطلاعاتی وجود ندارد. در این مطالعه به بررسی ناحیه بالادستی ژن c3 از ماهی قزل آلا پرداخته ایم. بافتهای مختلف ماهی تهیه و dna با روش تغییر یافته فنلکلروفرم استخراج شد. به کمک پرایمرهای دجنره طراحی شده برای ناحیه بالادستی این ژن که بر اساس اطلاعات سایر گونه ها انجام شد، با واکنش زنجیره پلیمراز غیر کلاسیک، قطعه هدف تکثیر و تعیین توالی و در نهایت در بانک اطلاعات ژنومی ثبت شد. در مرحله بعد به کمک سرورها و نرم افزارهای مختلف آناتومی کامل توالی بدست آمده از نظر وجود عناصر تنظیمی بررسی گردید. توالی ناحیه پروموتوری ژن c3 ماهی قزل آلا در بانک ژنومی ncbi با شماره دستیابی jq799884.1 به ثبت رسید. وجود توالیهای حفاظت شده جعبه tata و همچنین عناصر پاسخگو به فاکتورهایی مانند abaa ، c/ebp،ctcf، il6، gr و ppar ردگیری شد، هرچند وجود نواحی پاسخگو مانند sp1، cre، ere تایید نشد. نتایج این مطالعه علاوه بر تایید وجود سیستم نسبتا تکامل یافته ای از تنظیم روی سیستم کمپلمان در ماهی های استخوانی میتواند از قدیمی بودن این سیستم حمایت نماید. این مطالعه اولین گزارش دقیق از عناصر تنظیمی کنترل کننده بیان ژنی از سیستم کمپلمان است و شاید موید نقشهای جدیدی مانند دخالت مشتقات کمپلمان در تکوین اولیه جنین باشد که در مطالعاتی مطرح شده است.