تثبیت سلول کامل حاوی آنزیم الکل اکسیداز مخمرPichia Pastoris در ژل پلی آکریل آماید

الکل اکسیداز اولین آنزیم در مسیر اکسیداسیون متانول در مخمر pichia pastoris می‌باشد. نقش فیزیولوژیکی آن اکسیداسیون الکل‌های با زنجیره کوتاه، تبدیل آن‌ها به آلدهید‌ها است. اما کاربرد اصلی الکل اکسیداز به عنوان آشکارساز در طراحی بیوسنسور الکل‌ها می‌باشد. در این مطالعه‌، تثبیت سلول مخمر(‌pichia pastoris‌) و فعالیت الکل اکسیدازی آن است. در این پژوهش ابتدا فعالیت آنزیماتیک سلول‌ها با افزودن متانول 5/0 % به محیط کشت القا گردید‌. سپس نفوذ پذیری دیواره سلولی با cetyltrimethylammonium bromide (ctab) افزایش داده شده و در ژل پلی آکریل آماید تثبیت شدند. فعالیت الکل اکسیدازی در سلول‌های تثبیت شده به صورت اسپکتروفوتومتریک با روش abts/pod تعیین شد. فعالیت آنزیماتیک سلول نفوذ پذیر شده و تثبیت شده در ژل با سلول‌های آزاد در شرایط یکسان مقایسه شده و نتایج ثبت گردید. تثبیت سلول‌ها 14% افزایش را در فعالیت آنزیم نشان داد. فعالیت سلول تثبیت شده حاوی الکل اکسیداز، هنگامی که 2-بوتانول به عنوان سوبسترا به کار رفت‌، دارای بیشترین مقدار بود. بررسی نتایج این مطالعه نشان داد که سلول‌های تثبیت شده نسبت به سلول‌های آزاد برتری هایی را دارا است که شامل : افزایش فعالیت آنزیم‌، پایداری‌، جداسازی آسان از محیط کشت برای استفاده مجدد سلول‌ها و تاریخ انقضای طولانی تر‌، که موجب کاهش در هزینه تولید می‌گردد و تثبیت سلول‌ها می‌تواند به عنوان یک پروتوکل اختصاصی برای بیوسنسور‌های الکل‌، تولید آلدهید‌ها و سایر کاربرد‌های صنعتی مورد استفاده قرار گیرد.