اثرات تروگزروتین بر بیان mrna ژن های کد کننده لیزوزیم و فاکتور نکروز دهنده تومور آلفا و بافت شناسی پوست ماهی‌قرمز (carassius auratus)

تروگزروتین، که مشتقی از بیوفلاوونوئید طبیعی روتین به شمار می آید، اثرات زیستی مهمی، شامل فعالیت تحریک سیستم ایمنی، را ایجاد می کند. این مطالعه با هدف بررسی تاثیر افزودنی تروگزروتین خوراکی بر روی بافت شناسی و بیان mrna ژن های کد کننده لیزوزیم و فاکتور نکروز دهنده تومور آلفا در پوست ماهی قرمز (carassius auratus) انجام شد. بدین منظور بچه ماهی ها با میانگین وزن اولیه ی 0.08 ± 2.74 گرم توسط جیره های حاوی 0.1، 0.3، 0.5 گرم افزودنی تروگزروتین به ازای هر کیلوگرم جیره به مدت 80 روز تغذیه شدند. برای بررسی بافت شناسی، پوست سمت راست و نزدیک به باله پشتی ماهی ها به میزان 0.5 سانتی متر برداشته شده و در فرمالین %10 قرار داده شد. برای ارزیابی مولکولی، به ترتیب، مراحل استخراج rna، سنتز و بررسی cdna و real time pcr در پوست صورت گرفت. نتایج بافت شناسی پوست افزایش بیشتری را در تراکم سلول های هشدار دهنده گروه های تیمار نسبت به گروه کنترل نشان داد .p< 0.05نسبت حجمی سلول های هشدار دهنده به اپیدرم در گروه های تیمار، میزان بالاتری را نسبت به گروه کنترل نشان داد که این میزان افزایش در گروه های دریافت کننده دوز متوسط و دوز بالا بیشتر بود .(p< 0.05)در ضخامت لایه اپیدرم تفاوت معنا داری بین گروه های تیمار و گروه کنترل مشاهده نشد .(p>0/05) نتایج آزمایش های مولکولی، افزایش معنی داری را بین میزان بیان ژن کد کننده لیزوزیم در سه گروه تیمار، با گروه کنترل نشان داد (p< 0.05). علاوه بر آن، میزان بیان ژن کد کننده tnf-α; در گروه های دریافت کننده دوز متوسط و به خصوص دوز بالا، نسبت به گروه دریافت کننده دوز پایین و گروه کنترل افزایش معنی داری را نشان داد (p< 0.05). بنابراین، افزودن 0.5 گرم تروگزروتین به ازای هر کیلوگرم جیره غذایی، توانایی بهبود فاکتور های بافت شناسی و بیان mrna ژن های کد کننده لیزوزیم و tnf-α; در پوست ماهی قرمز را داراست.

effects of troxerutin on mrna expression of the genes encoding lysozyme and tumor necrosis factor-α and histology in goldfish (carassius auratus) skin

troxerutin, a derivative of the natural bioflavonoid rutin, has important biological effects, including immunostimulatory activity. this study aimed to evaluate the effects of dietary troxerutin supplement on histology and mrna expression of the genes encoding lysozyme and tumor necrosis factor-α; in goldfish, carassius auratus skin. fish fingerlings with mean initial weights of 2.74 ± 0.08 g were fed diets supplemented with 0.1, 0.3, 0.5 g troxerutin per kg feed for 80 days. for histological studies, skin from right side and near dorsal fin (0.5cm) was dissected and stored in 10% formalin buffer. for molecular assay on skin tissue, rna extraction, cdna synthesis, and real time pcr were performed. histology results showed a significant increase in alarm cell density in the treatment groups compared to the control group (p< 0.05). alarm cell volumetric ratio to epidermis was significantly higher in the treatment groups, with highest level in fish administrated with medium and high dose of troxerutin, in comparison with the control group (p< 0.05). epidermis thickness did not show significant changes in comparison with the control group (p>0/05). molecular assay results showed more increase in mrna expression of the genes encoding lysozyme and tumor necrosis factor-α; in the treatment groups, with the highest level in the high dose group, in comparison with the control group (p< 0.05). the results indicate that feeding troxerutin at 0.5 g per kg feed has a potential to enhance histology indices and mrna expression of the genes encoding lysozyme and tumor necrosis factor- α; in goldfish (carassius auratus) skin.