اثرات نونیل فنل بر بافت تخمدان و بیضه ماهیان نابالغ قزل‌آلای رنگین‌کمان(oncorhynchus mykiss)

نونیل فنل به عنوان یک ترکیب مختل کننده غدد درون ریز بطور وسیعی در صنایع مختلف کاربرد دارد. تخمین زده می شود که مقادیر هنگفتی از این ترکیب استروژنیک بطورسالانه وارد منابع آبی می شود. در این تحقیق به مطالعه سمیت تحت کشنده این ترکیب شبه استروژنی بر توسعه گناد و تغییرات آسیب شناسی بافتی بیضه و تخمدان ماهی قزل آلای رنگین کمان پرداخته شد. برای این منظور 360 عدد ماهی قزل آلای رنگین کمان با میانگین وزنی 5± 115 ﮔگرم بطور تصادفی به 6 گروه با سه تکرار تقسیم شدند. به صورت تزریق درون صفاقی در مواجه با دوزهای تصاعدی نونیل فنل (10، 50 و 100 میکروگرم در گرم وزن ماهی)، یک غلظت 17- بتا استرادیول (e2) (2 میکروگرم در گرم وزن ماهی) و کنترل حلال (اتانول و روغن نارگیل) قرارگرفتند، در حالیکه در ماهیان کنترل هیچگونه تزریقی صورت نگرفت. تزریق ها سه بار و در روزهای 0، 7 و 14 در غلظت کامل انجام پذیرفت. نمونه برداری بافتی گنادها در روز بیست و یکم انجام شد. نمونه های گناد در محلول بوئن تثبیت شده و مطابق روش استاندارد بافت شناسی از آنها مقاطع 6 میکرونی تهیه و به روش هماتوکسیلین ائوزین رنگ آمیزی شدند. سپس با استفاده از میکروسکوپ نوری مورد مطالعه قرارگرفتند. نتایج نشان داد که رشد اووسیت ها تحت تاثیر تیمارهای مختلف نونیل فنل و e2 قرارگرفته است، درحالیکه تغییری در مراحل اسپرماتوژنز مشاهده نشد. علاوه بر این، ضایعات هیستوپاتولوژیک مختلفی در بافت های تخمدان و بیضه ماهی های در معرض غلظت های مختلف نونیل فنل مشاهده شد. بطوریکه با افزایش غلظت این اثرات واضح تر و شدیدترشد. تغییرات هیستوپاتولوژیک تخمدان شامل اووسیت های آترتیک، هایپرپلازی سلول های گرانولوزا، پیکنوزه شدن هسته، واکوئولاسیون سیتوپلاسمی، تخریب گرانول های زرده و فروپاشی هسته بود. هایپرپلازی بافت بینابینی، فیبروزه شدن لوبول ها، هایپرتروفی سلول های سرتولی، توزیع غیر نرمال و دژنره شدن سلول های اسپرماتوگونیا، پیدایش واکوئل سلولی و نکروزه شدن هسته از مهمترین ضایعات بافتی مشاهده شده در بافت بیضه بود. بطورکلی، نتایج نشان داد که نونیل فنل می تواند تاثیرات قابل توجهی بر مراحل تکوین سلول های جنسی داشته باشد و باعث بروز تغییرات هیستوپاتولوژیکی در بافت تخمدان و بیضه گردد.

Effects of nonylphenol on ovarian and testicular tissues in immature rainbow trout (Oncorhynchus mykiss)

Nonylphenol (NP) is an endocrine disrupting chemical widely used in industrial practices worldwide. It is estimated that large amounts of this estrogenic compound annually discharged into aquatic ecosystem. So this study was conducted to determine the effects of this pseudoestrogen compound on gonadal maturation and histopathology of ovarian and testicular tissues of rainbow trout, Oncorhynchus mykiss. To this end, a total of 360 rainbow trout (115 ± 5 g) were randomly assigned into 6 groups with triplicates and intraperitoneally injected with ascending doses of NP (10, 50,100 μg/g body weight) or a single dose of E2 (2 μg/g body weight) or solvent control (ethanolcoconut oil), whereas controls were not injected. The injections were performed at three times in 0, 7, and 14 days in complete dose form and tissue sampling was carried out on the 21st day. The male and female gonads were fixed in Bouin’s fluid and 6 μm sections were prepared using the standard histological method. The sections were stained by the standard H&E staining method and the stained sections were examined using light microscope. The results demonstrated that oocytes development is affected by NP and E2 treatments, but had no effects on process of spermatogenesis. Moreover, various histopathological lesions were observed in ovary and testis tissues of fishes exposed to different nonylphenol concentrations, so that damages significantly increased with increasing concentration. Histopathological alterations in ovaries included atretic oocytes, hyperplasia of granulosa layer, nuclear pyknosis, cytoplasmic vacuolation, damage of yolk granules and nuclear disintegration. Hyperplasia of interlobular connective tissue, fibrosis of lobules, hypertrophy of sertoli cells, abnormal distribution and degenerative of spermatogonia, cellular vacuolation, and pyknotic nuclei were the most important tissue lesions observed in testicular tissue. In general, the results showed that NP has the potential to cause significant effects on gamete development stages and causes various lesions on ovarian and testicular tissues.