ارزیابی اثرات ضد میکروبی کیتین‌ و‌کیتوزان استحصالی از میگوی اروپایی(palaemon elegans) در دریای خزر

میگوی اروپایی (palaemon elegans) از سخت پوستان ساکن دریای خزر است. کیتین و شکل دانسیته آن (کیتوزان) یک پلیمر طبیعی با خاصیت ضد میکروبی است که به طور طبیعی در اسکلت خارجی سخت پوستانی مانند میگو وجود دارد. از کیتین و کیتوزان به طور گسترده در صنایع داروسازی،آرایشی و بهداشتی ،کشاورزی، زیست پزشکی و غذایی استفاده می شود. جهت انجام این مطالعه با نمونه بردار دریچ 977 قطعه میگوی p. elegans با میانگین طول کل 17.06±34.96 میلی متر و وزن0.168±1.17 گرم درسواحل استان گیلان صید شدند. میگوها در کیسه های زیپ دار حاوی یخ به آزمایشگاه منتقل و بر اساس کلید شناسایی سخت پوستان شناسایی شدند. پوسته میگو از ضایعات گوشت به صورت دستی جداسازی و سپس پوسته های تمیز شده جهت آبگیری و خشک شدن در محیط با تهویه مناسب قرار داده شدند. پس از خشک کردن، پوسته ها آسیاب و الک شده وحذف ترکیبات معدنی با استفاده از اسیدکلریدریک 2 نرمال، حذف ترکیبات پروتئینی با هیدروکسیدسدیم 5%، حذف ترکیبات رنگدانه ای با هیپوکلریت سدیم 3% انجام شد و درنهایت با حذف گروه های استیل از روی کیتین به دست آمده کیتوزان حاصل شد. میزان کیتین و کیتوزان به دست آمده از پوسته میگو به ترتیب 18.9 و17.4درصد محاسبه گردید. خواص ضد میکروبی کیتین و کیتوزان استخراج شده روی 5 سویه ی باکتریایی به روش انتشار دیسک و بر اساس دستورالعمل nccls مورد بررسی قرارگرفت. در نتایج اختلاف معنی داری در حساسیت باکتری های گرم مثبت با گرم منفی در کیتین و کیتوزان در پوسته میگو وجود داشت (0.05>p). محدوده ی حداقل غلظت بازدارندگی (mic) وحداقل غلظت باکتری کشی(mbc) برای کیتین به ترتیب بین500 -125 و1000-250 میکروگرم بر لیتر بود. محدوده ی حداقل غلظتmic و mbcبرای کیتوزان به ترتیب بین500 -250 و1000-500 میکروگرم بر لیتر بود. بیشترین هاله عدم رشد باکتری در کیتین و کیتوزان در k. pneumonia به ترتیب 0.08± 10.56 و 0.24±15.16میلی متر بود. کیتوزان نسبت کیتین از هاله عدم رشد بیشتری برخوردار بود. نتایج این بررسی نشان داد که کیتین و کیتوزان بدست آمده قابلیت ضد باکتریایی مناسبی داشته و این قابلیت وجود دارد که از خواص ضد میکروبی آن در صنایع غذایی و دارویی استفاده شود.

The antimicrobial of chitin and chitosan extracted from shrimp shell (Palameon elegans)

Palaemon elegans are distributed over a wide coastline of ocean and sea waters. distilled form (chitosan) is a natural polymer with antimicrobial properties that is naturally present in the exoskeleton of crustaceans, including shrimp. Chitin and chitosan are widely used in the pharmaceutical, cosmetic, agricultural, biomedical, food preparation and storage industries. 977 pieces of P. elegans shrimp with an average total length of 34.96 mm and a weight of 1.17 gr were caught on the shores of Guilan province with a sampling drij. The shrimps were transported to the laboratory in zippered bags containing ice and identified as crustaceans. Shrimp shells were separated from meat waste manually, then the cleaned shells were placed in a wellventilated environment for dehydration and drying. After drying, the shells were ground and passed through a sieve.Elimination of mineral compounds was achieved by using 2Normal hydrochloric acid, removal of protein compounds with 5% sodium hydroxide, removal of pigment compounds with 3% sodium hypochlorite and finally removal of acetyl groups from the chitin obtained from chitosan.Chitin and chitosan obtained from shrimp shell were calculated 18.9% and 17.4%, respectively.The antimicrobial properties of the extracted chitin and chitosan on 5 bacterial strains were investigated by disk diffusion method according to NCCLS instructions. There was a significant difference in the susceptibility of grampositive and gramnegative bacteria in chitin and chitosan in shrimp shell (P <0.05). The minimum inhibitory concentration (MIC) and minimum bactericidal concentration (MBC) for chitin were between 125500 and 2505000 micrograms per liter, respectively. The minimum concentration ranges of MIC and MBC for chitosan were between 2501000 and 5001000 μg / l, respectively. The highest inhibition of bacterial growth (mm) in chitin and chitosan in K. pneumonia was 10.56 ± 0.08 and 15.16± 0.24, respectively. Chitosan had a higher growth inhibition ratio than chitin.