بهینه سازی روش اشعه دهی uv جهت تخریب dna اسپرماتوزوای تاسماهی سیبری (acipenser baerii) در مطالعات گاینوژنزیز: سنجش کامت

القای گاینوژنزیز (ماده زایی) به اسپرماتوزوا با dna تخریب شده همزمان با تحرک بالا نیاز دارد. در این مطالعه برای بدست آوری این قابلیت در اسپرماتوزوای تاسماهی سیبری از اشعه uv با دوز 4257 ژول بر متر مربع استفاده شد. ابتدا مایع سمینال با استفاده از سانتریفیوژ از اسپرماتوزوا جدا شد و سپس اسپرم 10 درصد تهیه و تحت تابش اشعه uv در زمان های 30، 60، 90، 120 و 150 ثانیه قرار گرفت تا بهترین میزان تحرک و درصد تخریب dna با استفاده از روش سنجش دنباله (comet assay) در مقایسه با شاهد بدست آید. همزمان قابلیت لقاح این اسپرم ها در تخمک تاسماهی استرلیاد و میزان لارو تفریخ شده آن آزمایش گردید. بر اساس نتایج بدست آمده بهترین مدت زمان اشعه دهی به اسپرماتوزوا 90 ثانیه تعیین شد که در این مدت، میزان تخریب dna دنباله 1.96 ± 32.27 درصد، میزان تحرک اسپرم اشعه داده 50 درصد با حرکت رو به جلو، میزان لقاح 0.52 ± 52.1 درصد و میزان تفریخ تخم 0.11 ± 1.1 درصد بدست آمد. بنابراین اسپرم تاسماهی سیبری غیرفعال شده ژنتیکی می تواند در مطالعات گاینوژنزیز بین گونه ای در تاسماهیان با هدف تولید نتاج تمام ماده و به منظور حفاظت از انقراض آنها استفاده شود.

Optimization of UV radiation method for DNA degradation of Siberian sturgeon (Acipenser baerii) spermatozoa in gynogenesis studies: Comet assay

Induction of gynogenesis requires the spermatozoa with degraded DNA with high motility, simultaneously. In this study, to obtain this capability in Siberian sturgeon spermatozoa, UV radiation with a dose of 4257 j/m2 was applied. First, the seminal fluid was separated from the spermatozoa using a centrifuge, and then 10% of the sperm was prepared and irradiated with UV radiation for 30, 60, 90, 120, and 150 seconds to obtain the best motility and percentage of DNA damage using the comet assay method in comparison with the control. Simultaneously, the fertilization ability of these sperms was tested in sterlet sturgeon eggs and the rate of hatched larvae. Based on the results, the best duration of irradiation of spermatozoa was determined to as 90 seconds. The DNA degradation rate was 32.27±1.96 percent, the motility rate was 50% with forwarding movement, the fertilization rate was 52.1±0.52 percent, and the egg hatching rate was 1.1±0.11 percent. Therefore, genetically inactivated Siberian sturgeon sperm could be used in interspecific gynogenesis studies in sturgeon. Either to producing offspring of all females or to protect their extinction.