|
|
|
|
enhancement of agrobacteriummediated transformation efficiency in immature embryo of triticum aestivum, cv. arya
|
|
|
|
|
|
|
|
نویسنده
|
ahmadpour roghayeh ,zare nasser ,asghari-zakaria rasool ,sheikhzadeh parisa
|
|
منبع
|
iranian journal of genetics and plant breeding - 2015 - دوره : 4 - شماره : 1 - صفحه:45 -53
|
|
چکیده
|
An efficient agrobacterium-mediate transformation method was developed by employing different duration of sonication, agrobacterium strains, type of inoculation medium and concentrations of acetosyringone in arya cultivar of wheat. immature embryos were used as an explant for inoculation with agrobacterium tumefaciens harboring the recombinant pbi121 plasmid. among the durations of sonication the highest percentage of gus positive immature embryos (54.58 ± 1.14%) and transformation (0.78 ± 0.07%) was observed in 10-seconds of sonication. among the agrobacterium strains, the highest gus expression was 62.50 ± 1.55% and 0.39 ± 0.04% with lba4404 strain. between types of inoculation medium, the highest gus positive immature embryos and transformation (1.86 ± 0.14% and 0.75 ± 0.04%, respectively) was observed in using the im inoculation medium. between concentrations of acetosyringone, the highest transformation was 0.75 ± 0.04% obtained at 200 μm acetosyringone. also, the studying of simultaneous effects showed that the highest transformation efficiency (1.56 ± 0.06%) obtained from immature embryos inoculated with lba4404 strain followed by 10-seconds sonication, immature embryos inoculated with agrobacterium in im inoculation medium after 10-seconds sonication and immature embryos inoculated with agrobacterium in inoculation medium containing 200 μm acetosyringone after 10-seconds of sonication.
|
|
کلیدواژه
|
acetosyringone ,agrobacterium ,inoculation medium ,sonication ,transformation.
|
|
آدرس
|
university of mohaghegh ardabili, faculty of agriculture, department of agronomy and plant breeding, ایران, university of mohaghegh ardabili, faculty of agriculture, department of agronomy and plant breeding, ایران, university of mohaghegh ardabili, faculty of agriculture, department of agronomy and plant breeding, ایران, university of mohaghegh ardabili, faculty of agriculture, department of agronomy and plant breeding, ایران
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
افزایش کارآیی تراریختی بواسطه آگروباکتریوم در جنین نارس گندم رقم آریا
|
|
|
|
|
Authors
|
احمدپور رقیه ,زارع ناصر ,اصغری زکریا رسول ,شیخ زاد مصدق پریسا
|
|
Abstract
|
روش کارآمد تراریختی بواسطه آگروباکتریوم از طریق استفاده از زمانهای مختلف امواج فراصوت، سویههای آگروباکتریوم، نوع محیط تلقیح و غلظتهای مختلف استوسرینگون در رقم آریا گندم تهیه گردید. از ریزنمونه جنین نارس برای تلقیح با باکتری آگروباکتریوم تومهفاسینس حاوی پلاسمید نوترکیب pBI121 استفاده شد. بین زمانهای مختلف استفاده از امواج فراصوت بیشترین درصد جنینهای نارس GUS مثبت (14/1 ± 58/54 درصد) و تراریختی (07/0 ± 78/0 درصد) در 10 ثانیه امواج فراصوت مشاهده گردید. بین سویههای آگروباکتریوم، بیشترین بیان موقت و پایدار ژن GUS با میانگین 55/1 ± 50/62 درصد و 04/0 ± 39/0 درصد در سویه LBA4404 بود. بین انواع مختلف محیط تلقیح، بیشترین جنینهای نارس GUS مثبت و تراریختی (به ترتیب 14/0 ± 86/1 درصد و 04/0 ± 75/0 درصد) با کاربرد محیط تلقیح IM مشاهده شد. بین غلظتهای استوسرینگون، بیشترین تراریختی با میانگین 04/0 ± 75/0 درصد با کاربرد 200 میکرومولار استوسرینگون بدست آمد. همچنین، مطالعه اثرات کاربرد همزمان نشان داد که بیشترین کارآیی تراریختی (06/0 ± 56/1 درصد) در جنینهای نارس تلقیح شده با سویه LBA4404 پس از 10 ثانیه تیمار امواج فراصوت، جنینهای نارس تلیقح شده با آگروباکتریوم در محیط تلقیح IM پس از 10 ثانیه امواج فراصوت و جنینهای نارس تلقیح شده با آگروباکتریوم در محیط تلقیح حاوی 200 میکرومولار استوسرینگون پس از 10 ثانیه امواج فراصوت حاصل میشود.
|
|
Keywords
|
آگروباکتریوم، استوسرینگون، امواج فراصوت، تراریختی، محیط تلقیح
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|