study of the presence of dreb1/ cbf gene family in viola tricolor

Transcription factors are known as factors having the ability to simultaneously activate several genes in plant and animal genomes. because of their significance in responding to environmental stresses like salinity, drought, temperature changes, etc., a group of these transcription factors known as dreb1/ cbf (dehydration-responsive element binding protein 1/ c-repeat binding factor) gene family has been extensively studied in various plant species. in this research, considering the particular and well-stablished role of the genes of this family in cold stress in plants, viola tricolor (wild pansy), as a cold resistant species, was chosen to identify this gene family. for this purpose, viola plants in the multi-leaf stage were gradually transferred to a -8 °c chamber and subjected to subfreezing treatment for 18 h. using bioinformatics analysis based on ncbi database, the initial identification of the ap2/ erf (apetala2/ ethylene-responsive factor) conserved region in the genes of the members of this family was carried out and the consensus sequence was used for primer design. the sequencing result revealed considerable sequence similarity in this region with genes found in other plant species. thus, as predicted, this work established the presence of the dreb1 gene family in v. tricolor. the closest species to v. tricolor was also determined by drawing the phylogenetic tree based on the identified region. the gene expression pattern analysis revealed a significant increase in expression of this gene under cold stress conditions.

مطالعه حضور خانواده ژنی dreb1/ cbf در بنفشه سه رنگ

فاکتورهای رونویسی به عنوان عواملی که قابلیت فعال سازی همزمان چندین ژن را در ژنوم های گیاهی و جانوری دارند، شناخته شده اند. دسته ای از این فاکتورهای رونویسی بنام خانواده ژنی dreb1/ cbf (c-repeat binding factor/ dehydration-responsive element binding protein 1) به علت نقش کلیدی آن ها در پاسخ به تنش های محیطی اعم از شوری، خشکی، تغییرات دمایی و ... به صورت گسترده ای در گونه های مختلف گیاهی مورد مطالعه قرار گرفته اند. در این تحقیق، با توجه به نقش ویژه و اثبات شده ژن های موجود در این خانواده در تنش سرما در گیاهان، viola tricolor، به عنوان یک گونه مقاوم به سرما، برای شناسایی این خانواده ژنی انتخاب شد. برای این کار گیاهان بنفشه در مرحله چندبرگی و بصورت تدریجی به محفظه ای با دمای 8- درجه سانتی گراد منتقل شدند و به مدت 18 ساعت تحت تیمار انجمادی قرار گرفتند. استخراج rna کل از بافت برگ انجام شد و برای سنتز cdna مورد استفاده قرار گرفت. با استفاده از آنالیز بیوانفورماتیکی در پایگاه داده ncbi شناسایی اولیه ناحیه حفاظت شده ap2/ erf (apetala2/ ethylene-responsive) در ژن های اعضای این خانواده انجام شد و توالی حاصل برای طراحی پرایمر مورد استفاده قرار گرفت. نتیجه توالی یابی تشابه توالی بالا را در این ناحیه با ژن های شناسایی شده در سایر گونه های گیاهی نشان داد. بنابراین مطابق پیش بینی، در این مطالعه حضور خانواده ژنی dreb1 در گونه v. tricolor، اثبات شد. رسم درخت فیلوژنتیک براساس ناحیه شناسایی شده نیز نزدیک ترین گونه ها به ویولا تریکالر را مشخص نمود. بررسی الگوی بیان ژن افزایش قابل توجه در بیان این ژن را در شرایط استرس سرمایی نشان داد.