ارزیابی خصوصیات پروبیوتیکی باکتریهای جدا سازی شده از دستگاه گوارش دلقک ماهی کلارکی (amphiprion clarkii bennett,1830) در شرایط برون تنی

پروبیوتیک ها میکروارگانیسم های زنده ای هستند که با تولید متابولیت های زیست فعال در دستگاه گوارش موجود زنده، باعث مقابله با میکروارگانیسم های بیگانه و افزایش سلامت میزبان خود می شوند. مطالعه حاضر با هدف جداسازی، غربالگری و شناسایی پروبیوتیک  بومی از دلقک ماهی کلارکی) (amphiprion clarkii انجام شد. پس از بررسی ویژگی های مرفولوژیکی جدایه ها، فعالیت ضدمیکروبی آن ها بر روی باکتری های بیماریزا با روش چاهک گذاری ارزیابی شد. ایمنی زیستی جدایه ها با استفاده از فعالیت همولیتیک، حساسیت به آنتی بیوتیک ها و تولید آنزیم های لیپاز و ژلاتینازمورد بررسی قرار گرفت. جدایه های منتخب بر اساس شاخص های اولیه پروبیوتیکی شامل مقاومت به اسید، نمک های صفراوی و توانایی کلونیزه شدن در روده میزبان ارزیابی گردیدند و در نهایت با استفاده از روش مولکولی 16s rrna شناسایی شدند. در مجموع 29 جدایه از دستگاه گوارش a .clarkii جداسازی شد. که از میان آن ها هفت جدایه که دارای فعالیت ضد میکروبی بر علیه تمام عوامل بیماریزای مورد مطالعه بودند، مورد ارزیابی ایمنی زیستی قرار گرفتند. جدایه های cs29  و cs18 با موفقیت جنبه های ایمنی زیستی آن ها اثبات شد. جدایه های مذکور از نظر مقاومت به ph اسیدی، شیره معده شبیه سازی شده و نمک های صفراوی، آبگریزی بالا نسبت به حلال ها، پتانسیل تجمعی و کمک تجمعی فعالیت خوبی نشان دادند. با تجزیه و تحلیل توالی ژن 16s rrna، جدایه های  cs29وcs18  ، به ترتیب بالاترین تشابه را با vibrio kanaloae  (98/19درصد) وvibrio sp. (97.16 درصد) نشان دادند. نتایج نشان داد که جدایه های vibrio kanaloae cs18  وsp. cs29  vibrioدارای فعالیت ضد میکروبی وسیعی بوده و توانایی کلونیزاسیون در شرایط روده را دارند. این جدایه ها قابلیت مطالعه به عنوان پروبیوتیک در شرایط برون تنی را دارند.

in vitro evaluation of probiotic properties of bacteria isolated from the digestive tract of clark's clownfish (amphiprion clarkia bennett, 1830)

probiotics are live microorganisms that promote the health of their host by producing bioactive metabolites in the digestive tract, where they combat harmful microorganisms. this study aimed to isolate, screen, and identify native probiotics from clark’s clownfish (amphiprion clarkii). after assessing the morphological characteristics of the isolates, their antimicrobial activity against pathogenic bacteria was evaluated using the well-diffusion method. the biosafety of the isolates was also investigated, focusing on hemolytic activity, antibiotic sensitivity, and the production of lipase and gelatinase enzymes. the selected isolates were then assessed for key probiotic traits, including resistance to acidic conditions, bile salts, and their ability to colonize the host’s intestine. a total of 29 bacterial isolates were obtained from the digestive tract of a. clarkii, with seven showing antimicrobial activity against all the tested pathogenic bacteria. these seven isolates were further evaluated for biosafety, and isolates cs29 and cs18 demonstrated favorable biosafety profiles. both isolates exhibited strong resistance to acidic ph, simulated gastric juice, and bile salts, as well as high hydrophobicity, aggregation potential, and co-aggregation. phylogenetic analysis of the 16s rrna gene sequences revealed that isolates cs29 and cs18 had the highest similarity to vibrio kanaloae (98.19%) and vibrio sp. (97.16%), respectively. the results indicate that vibrio kanaloae cs18 and vibrio sp. cs29 possess broad antimicrobial activity and the ability to colonize the intestinal tract, suggesting their potential as probiotics for further in vitro study.