اثرات ضدسرطانی و مهارکنندگی آنزیم استیل کولین استراز عصاره فیلتر شده صفحه دهانی شقایق دریایی (stichodactyla haddoni)

در مطالعه حاضر، اثرات مهاری استیل کولین استراز و فعالیت کاسپازی بخش دهانی شقایق دریایی موکتی stichodactlya haddoni بررسی شد. نمونه‌های s. haddoni از منطقه بین جزر و مدی جزیره هرمز خلیج‌فارس تهیه شدند. جهت جداسازی فرکشنی با وزن ملکولی kda100-30 از عصاره خام، اولترا فیلتراسیون میلی پور انجام شد. روش ellman جهت سنجش مهار استیل کولین استراز استفاده گردید. سنجش فعالیت کاسپاز 3 با استفاده از کیت کالریمتریک سنجش کاسپاز در سلول سرطانی سینه mcf7 انجام گرفت. در پایان آزمایش، بیشترین درصد مهار استیل کولین استراز در غلظت mg/ml 6 از فرکشن kda10030 مشاهده شد (p<0.05). میزان فعالیت کاسپاز 3 در سلول‌های سرطانی mcf7 تیمار شده با غلظت micro;g/ml 400، 600 و 800 نشان داد که پروتئین کاسپاز 3 فعالیت معنی‌داری را پس از طی مدت 12، 24 و 48 ساعت داشت (p<0.05). غلظت micro;g/ml 600 در فرکشن kda10030 بعد از گذشت هر سه زمان، بیشترین فعالیت کاسپازی را از خود بروز داد. درمجموع می‌توان بیان نمود که سموم پروتئینی s. haddoni با وزن مولکولی kda30 تا 100 می‌توانند اثرات ضد آلزایمری با مهار آنزیم استیل کولین استراز و اثر کشندگی بر سلول‌ سرطانی سینه از طریق فعال کردن کاسپاز 3 و القای احتمالی اپوپتوز داشته باشند.

Inhibitory effect of acetylcholinesterase and caspase activity of human breast cancer cells (MCF-7) treated with filtered extracts of the sea anemone oral disk (Stichodactyla haddoni)

The present study investigated the inhibitory effects of the oral disk extract of sea anemone, Stichodactlya haddoni on acetylcholinesterase and caspase activity. The sea anemone samples were obtained from the intertidal zone of the Hormuz Island in the Persian Gulf. Millipore ultrafiltration was carried out to separate different fractions of the crude extract. Ellman method was used to measure acetylcholinesterase inhibition. The activity of caspase 3 was measured using a calorimetric assay kit of Caspase in breast cancer cell MCF7. At the end of the experiment, the highest percentage of inhibition of the acetylcholinesterase was observed in 6 mg/ml of the 30100 kDa fraction (p<0.05). The activity of caspase 3 in MCF7 treated with concentrations of 400, 600 and 800 mu;g/ml from the fraction 10030 kDa were significantly different after 12, 24 and 48 hours (p<0.05). The concentration of 600 mu;g/ml in the desired fraction showed the highest caspase activity after all the three mentioned times. In conclusion, the protein toxins of the sea anemone, S. haddoni, with a molecular weight of 30 to 100 kD can have antiAlzheimer #39;s effects by inhibiting acetylcholinesterase enzyme and the lethality effects on the breast cancer cell by activating caspase 3 and possibly inducing apoptosis.