تاثیر ترکیبات محیط‌کشت بر رشد و تولید آزادیراختین در کشت سوسپانسیون سلولی چریش (azadirachta indica)

آزادیراختین یکی از مهم ترین متابولیت ثانویه چریش است که به عنوان آفت کش طبیعی استفاده می شود. در این مطالعه تاثیر غلظت های مختلف ساکارز (1، 2، 3، 4 و 5 درصد)، کلسیم کلرید، مونو پتاسیم فسفات، پتاسیم نیترات، منیزیم سولفات ونیترات آمونیوم  (غلظت های x0.5، x1، x1.5، x2 و x2.5 محیط کشت ms پایه) روی رشد سوسپانسیون سلولی چریش و تولید آزادیراختین مورد بررسی قرار گرفت. اگر چه بین تعدادی از غلظت های تیمارهای اعمال شده اختلاف آماری معنی داری از نظر شاخص های مورد مطالعه وجود نداشت اما بیشترین مقدار وزن تر و خشک با کاربرد 3 درصد ساکارز، x1 کلسیم کلرید، x1 منیزیم سولفات و x1نیترات آمونیوم  (493.02 و 77.27 گرم در لیتر)، x2.5 مونو پتاسیم فسفات (500.97 و 80.77 گرم در لیتر) و x0.5 پتاسیم نیترات (495.01 و 78.41 گرم در لیتر) حاصل شد. بالاترین حجم سلول های ساکن با کاربرد 4 درصد ساکارز (95.69 درصد)، x1 کلسیم کلرید و x1نیترات آمونیوم  (94.93 درصد)، x2.5 مونو پتاسیم فسفات (97.22 درصد)، x0.5 پتاسیم نیترات (94.96 درصد) و x2 منیزیم سولفات (94.96 درصد) به دست آمد. حداکثر مقدار تجمع آزادیراختین با کاربرد 4 درصد ساکارز (3.72 میلی گرم در گرم وزن خشک)، x0.5 کلسیم کلرید (3.80 میلی گرم در گرم وزن خشک)، x0.5 مونو پتاسیم فسفات (3.73 میلی گرم در گرم وزن خشک)، x1 و x1.5 پتاسیم نیترات (3.69 میلی گرم در گرم وزن خشک)، x1 منیزیم سولفات (3.69 میلی گرم در گرم وزن خشک) و x1.5نیترات آمونیوم  (3.71 میلی گرم در گرم وزن خشک) مشاهده گردید. بیشترین مقدار تولید آزادیراختین نیز با مقدار 286.65 میلی گرم در لیتر در محیط کشت ms پایه حاوی 3 درصد ساکارز حاصل شد.

The effect of medium compounds on growth and azadirachtin production in cell suspension culture of neem (Azadirachta indica)

Azadirachtin is an important secondary metabolite of neem which is used as a natural biopesticide. In this study the effect of different concentrations of sucrose (1, 2, 3, 4 and 5%), calcium chloride, monopotassium phosphate, potassium nitrate, magnesium sulfate and ammonium nitrate (0.5x, 1x, 1.5x, 2x and 2.5x concentrations of MS base medium) on neem cell suspension growth and azadirachtin production was investigated. Although there were no significant difference between some of the treatment in terms of studied indices, the highest amount of fresh and dry cells weight were obtained by using 3% sucrose, 1x calcium chloride, 1x magnesium sulfate and 1x ammonium nitrate (493.02 and 77.27 g/L), 2.5x monopotassium phosphate (500.97 and 80.77 g/L) and 0.5x potassium nitrate (495.01 and 78.41 g/L). The highest settled cell volume was obtained by application of 4% sucrose (59.69%), 1x calcium chloride and 1x ammonium nitrate (94.93%), 2.5x monopotassium phosphate (97.22%), 0.5x potassium nitrate (94.96%) and 2x magnesium sulfate (94.96%). Maximum amount of azadirachtin accumulation observed by using 4% sucrose (3.72 mg/g DW), 0.5x calcium chloride (3.80 mg/g DW), 0.5x monopotassium phosphate (3.73 mg/g DW), 1x and 1.5x potassium nitrate (3.69 mg/g DW), 1x magnesium sulfate (3.69 mg/g DW) and 1.5x ammonium nitrate (3.71 mg/g DW). The highest amount of azadirachtin production was 286.65 mg/L obtained in MS basal medium supplemented with 3% sucrose.