تاثیر آبسیزیک اسید، نیترات نقره و سفوتاکسیم بر روی پرآوری درون‌شیشه‌ای خیار و ارزیابی کلون‌های باززایی شده با نشانگر مولکولی aflp

به منظور پرآوری درون‌شیشه‌ای خیار (cucumis sativus l.) با روش اندام‌زائی، ریزنمونه‌های برگ‌بذری دو رقم بت‌آلفا و دستگردی استفاده شدند. در طی مراحل اندام‌زائی جهت ایجاد شاخساره، محیط‌های کشت ms حاوی 2 میلی‌گرم در لیتر بنزیل‌آمینوپورین (bap) بعلاوه 8 حالت ترکیبی آبسیزیک اسید (aba) (0 و 1 میلی‌گرم در لیتر)، نیترات نقره (0 و 5 میلی‌گرم در لیتر) و سفوتاکسیم (0 و 200 میلی‌گرم در لیتر) ارزیابی شدند. نتایج حاصل از اندام‌زائی بیانگر تاثیر معنی‌دار aba بر روی افزایش درصد القاء شاخساره و تعداد شاخساره بود. نیترات نقره تنها در محیط‌های فاقدaba موجب افزایش معنی‌دار درصد القاء شاخساره و تعداد شاخساره گردید. همچنین اثر نامطلوب سفوتاکسیم مشاهده نشد و حتی در یک حالت افزایش تعداد شاخساره‌های القائی تحت تاثیر سفوتاکسیم مشاهده گردید. جهت ریشه‌زائی، شاخساره‌های جدا شده بر روی 5 محیط مختلف شامل یک محیط فاقد تنظیم‌کننده رشد و چهار محیط حاوی ایندول بوتیریک اسید (iba) (0.1 و 1 میلی‌گرم در لیتر) یا نفتالن استیک اسید (naa) (0.1 و 1 میلی‌گرم در لیتر) قرار گرفتند. بیشترین تعداد ریشه در هر شاخساره در ارقام بت‌آلفا (9.4) و دستگردی (8.6) در محیط حاوی 0.1 میلی‌گرم در لیتر iba مشاهده گردید. جهت ارزیابی پایداری ژنتیکی در بین کلون‌های حاصل، 10 گیاهچه باززائی شده از رقم بت‌آلفا به صورت تصادفی انتخاب و توسط نشانگر aflp بررسی شدند. همچنین 10 گیاهچه باززائی شده از هر دو رقم تحت بررسی سیتوژنتیکی قرار گرفتند. با استفاده از 9 ترکیب آغازگری نشانگر aflpدر مجموع 293 باند تکثیر شدند که همگی یک شکل و بدون تنوع سوماکلونال بودند. شمارش کروموزومی سلول‌های مریستمی ریشه بیانگر ثبات پلوئیدی در کلون‌های حاصل بود.

The effects of abscisic acid, silver nitrate and cefotaxime on cucumber in vitro organogenesis and evaluation of regenerated clones by AFLP marker

In vitro organogenesis of cucumber (Cucumis sativus L.) was evaluated using the cotyledonary explants of ldquo;Beth Alpha rdquo; and ldquo;Dastgerdi rdquo; cultivars. Organogenesis was examined on the MS medium containing 2 mgl1 Benzylaminopurine (BAP) along with eight combinations of abscisic acid (ABA) (0 and 1 mgl1), silver nitrate (0 and 5 mgl1), and cefotaxime (0 and 200 mgl1). The results indicated the significant effect of ABA on increasing the percent of shoot induction and number of regenerated shoots. In the absence of ABA, silver nitrate had a significant effect on shoot induction and number of shoots. Not only the negative effects of cefotaxime was not observed, but also the number of shoots increased in one case. Root induction in the regenerated shoots was also studied using 5 different media including PGRfree MS medium and the media containing indolebutyric acid (IBA) (0.1 and 1 mgl1) or naphthaleneacetic acid (NAA) (0.1 and 1 mgl1). The highest number of roots per shoot in ldquo;Beth Alpha rdquo; (9.4) and ldquo;Dastgerdi rdquo; (8.6) were observed in the MS medium supplemented with 0.1 mgl1 IBA. The genetic stability among 10 randomly selected clones of ldquo;Beth Alpha rdquo; cultivar was evaluated using AFLP markers. Besides that, cytogenetic assessment of 10 clones from each cultivar was implemented. In total 293 monomorphic bands were amplified using 9 primer combinations of AFLP marker, indicating the absence of somaclonal variation. The chromosome counting of root meristematic cells revealed the stability of ploidy level among regenerated clones.