|
|
تعیین خصوصیات لاین سلولی bhk-21c5 و معرفی آن جهت استفاده در مطالعات تحقیقاتی، تشخیصی و تولید فرآوردههای بیولوژیک
|
|
|
|
|
نویسنده
|
ضیائی فر فرشته ,سلیمانی سینا ,لطفی محسن
|
منبع
|
نشريه دانشگاه علوم پزشكي البرز - 1399 - دوره : 9 - شماره : 4 - صفحه:405 -414
|
چکیده
|
زمینه و هدف: مطالعات متعددی برای استفاده از لاینهای سلولی در مطالعات تحقیقاتی، تولید و فرآوری داروها و فراوردههای بیولوژیک و تشخیص سمیت و اثربخشی مواد صورت گرفته است. مطالعه حاضر به منظور بررسی خصوصیات لاین سلولی bhk-21 c5 به عنوان یک بستر مناسب جهت استفاده در فرآیند تولید و کنترل کیفیت واکسن و یا کشت ویروسها و مطالعات تحقیقاتی و تشخیصی انجام شده است. مواد و روشها: در این مطالعه کاربردی توسعه ای با تهیه بذر سلولی مناسب، سلول به روش limit dilution کلون شد. پس از بررسی ویژگیهای رشد سلول، آزمایشات سترونی برای بررسی آلودگیهای باکتریایی، قارچی، مایکوپلاسمایی و مایکوباکتریومی و آزمایشهای تعیین هویت سلول با استفاده از آزمایشهای مولکولار در کنار لاینهای سلولی cho، lk، rbk، mrc5، و vero و کاریوتایپینگ انجام شد. همچنین بذر سلولی مادر از جهت وجود ویروسهای ناخواسته، در روش مستقیم از طریق ایجاد ضایعات سلولی در طول دوره انکوباسیون و در روش غیرمستقیم با استفاده از آزمایشهای heamadsorption، تزریق به تخم مرغ جنیندار، تزریق به موش بالغ و شیرخوار مورد سنجش قرار گرفت. یافته ها: آزمایشهای انجام شده بر روی لاین سلولی مذکور نشان میدهد که این سلول دارای ویژگیهای رشد مناسب بوده و فاقد آلودگیهای متقاطع میباشد. همچنین هویت سلول با روشهای کاریوتایپینگ و مولکولار تایید شد.نتیجهگیری: نتایج آزمایشهای مختلف نشان میدهد که این لاین سلولی الزامات لازم برای استفاده در تولید و کنترل کیفیت فرآوردههای بیولوژیک و همچنین مطالعات تحقیقاتی را دارا میباشد.
|
کلیدواژه
|
لاین سلولی bhk، تعیین خصوصیات، کاریوتایپینگ، واکسن، بذر سلولی مادر
|
آدرس
|
دانشگاه آزاد اسلامی واحد علوم و تحقیقات, گروه زیست شناسی, ایران, سازمان تحقیقات، آموزش و ترویج کشاورزی, موسسه تحقیقات واکسن و سرم سازی رازی, دپارتمان بیوبانک, ایران, سازمان تحقیقات، آموزش و ترویج کشاورزی, موسسه تحقیقات واکسن و سرم سازی رازی, دپارتمان کنترل کیفی واکسنهای ویروسی, ایران
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Characterization of the BHK-21C5 Cell line and Its Introduction for use in Research, Diagnostics and Production of Biological Products
|
|
|
Authors
|
Ziaiifar Fereshteh ,Soleimani Sina ,Lotfi Mohsen
|
Abstract
|
Background and Objectives: Several studies have been carried out on the use of cell lines in researches, production and processing of drugs and biological products, and on the identification of toxicity and efficacy.The present study was conducted to determine the characteristics of BHK21 cell lines as a suitable substrate for use in vaccine production and quality control, viral culture and research and diagnostic studies.Materials and Methods: In this study cloning of the cells by limit dilution was performed by preparing the appropriate seed cells. After checking the cell growth characteristics, sterility tests performed to ensure the absence of bacterial, fungal, mycoplasma, and mycobacterial infections. Detection of chromosomal diversity by karyotyping and cell identity using molecular tests along the CHO,LK,RBK,MRC5,Vero,GL cell lines was done. Also, master cell seed was tested for detection of adventitious viruses in two methods: in direct way through cytopathic effect during incubation of cell cultures and in indirect method using hemadsorption test, inculation into embryonic eggs, injection into mature and newborn mice.Results: The results indicated, this cell line had suitable growth charestristics without cross contaminations. Also the cell identity was confirmed by karyotyping and molecular tests. Conclusion:The results of various tests indicated that this cell line has the necessary requirements for use in the production and quality control of the biological products and viral researches.
|
Keywords
|
BHK cell line ,Karyotyping ,Vaccine ,Master cell seed ,Characterization
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|