بررسی هم‌افزایی داروی فلورویوراسیل و هارمین در القای آپوپتوز رده سلولی aspc-1 و بیان ژن‌های آپوپتوتیک

هدف: سرطان پانکراس یکی از کشنده‌‌ترین سرطان‌‌های مربوط به سیستم دستگاه گوارش در جهان محسوب می‌شود. با توجه به افزایش مقاومت سلول‌های سرطانی به شیمی‌درمانی و عوارض جانبی آن، نیاز به داروهایی با عوارض جانبی کمتر و همچنین دارای منشا طبیعی احساس می‌شود. روش ها: در این تحقیق تجربی به بررسی اثر هارمین و استفاده توام آن با فلورویوراسیل برای القای آپوپتوز در سلول‌های سرطانی پانکراس، رده‌ سلولی aspc-1 پرداخته شد. برای مطالعه اثرات سایتوتوکسیک از روش رنگ‌سنجی و سمیت سلولی برای بررسی تعیین نوع مرگ سلولی از روش رنگ‌آمیزی‌(4,6-diamidino-2-phenylindole dihydrocholoride) dapi  و تست   annexin v/‌pi (annexin-v propidium iodide) استفاده شد. میزان بیان ژن‌های آپوپتوزی p53, ‌bax, caspase-3 و caspase-9 با روش real time-pcr اندازه‌گیری شد. داده‌ها با روش آماری (آزمون واریانس یک‌طرفه آنووا) در سطح معناداری p<0.05 و با نرم افزار spss نسخه 16 آنالیز شد. یافته ها: یافته‌های حاصل از روش mtt نشان داد کاربرد توام هارمین با غلظت 20 میکروگرم بر میلی‌لیتر و فلورویوراسیل با دُز 10 میکروگرم بر میلی‌لیتر سبب کاهش رشد (05/ic50, p<0) رده aspc-1 شد. نتایج به دست‌آمده از رنگ‌آمیزی dapi و تست انکسین القای آپوپتوز را در نمونه‌های تحت آزمایش نشان داد. همچنین نتایج تست ریل‌تایم نیز نشان داد بیان ژن‌های ،p53 کاسپاز 3،bax  و کاسپاز 9 در گروه‌‌های آزمایش نسبت به گروه کنترل افزایش معنادار (‌p<0/05) یافته است. نتیجه گیری: نتایج نشان داد کاربرد هم‌زمان هارمین و فلورویوراسیل به‌دلیل داشتن سیتوتوکسیسیته بالا باعث القای آپوپتوز در سلول‌های سرطانی پانکراس و کاهش غلظت مصرفی داروی شیمی‌درمانی می‌شود. بنابراین می‌توان آن را به‌عنوان کاندیدایی جهت همراهی با داروی سرطان پیشنهاد کرد.

effect of fluorouracil combined with harmine on induction of apoptosis in apoptosis induction in pancreatic cancer cells (aspc-1) and the expression of apoptotic genes (bax, p53, caspase-3, and caspase-9)

objective: pancreatic cancer is one of the deadliest cancers related to the digestive system in the world. due to the increasing resistance of cancer cells to chemotherapy and its side effects, there is a need for drugs with fewer side effects and natural origin. in this study, the effect of harmine combined with fluorouracil on apoptosis induction in pancreatic cancer cells (aspc-1) and the expression of apoptotic genes was investigated. methods: in this experimental study, mtt assay was used to study the cytotoxic effects. annexin v/propidium iodide test and dapi staining method were used to determine the type of cell death. the expression of apoptotic genes (p53, bax, caspase-3, and caspase-9) was measured by real-time pcr. the data were analyzed using one-way anova in spss software, version 16. the significance level was set at 0.05. results: the results of mtt assay showed that the use of harmine at 20 μg/ml concentration combined with 10 μg/ml fluorouracil significantly reduced the growth (ic50) of aspc-1 cells. the results of dapi staining and annexin v/propidium iodide test showed the induction of apoptosis in treated samples. in addition, the results of real-time pcr showed that the expression of bax, p53, caspase-3 and caspase-9 genes increased in the treated groups compared to the control group. conclusion: the combined use of harmine and fluorouracil can induce apoptosis in pancreatic cancer cells due to high cytotoxicity and reduce the concentration of chemotherapy drugs. therefore, this method can be used along with other treatment methods for pancreatic cancer.