تاثیر پروتئین ضد ویروسی گیاه لاله عباسی (map) در آلودگی های ناشی از ویروس موزاییک خیار (cmv) و ویروس y سیب زمینی (pvy) در گیاه nicotiana benthamiana در شرایط گلخانه

در این تحقیق تلاش شد تا با استفاده از پروتئین ضد ویروسی گیاه لاله عباسی mirabilis antiviral protein (map) در شرایط گلخانه علاوه بر کنترل (cmv) cucumber mosaic virus و (pvy) potato virus y ، مکانیسم کنترل کنندگی آن نیز مورد بررسی قرار گیرد. برای این منظور ابتدا map از عصاره های برگ و ریشه گیاه لاله عباسی جداسازی شد و سپس گیاهچه های nicotiana benthamiana در گلدانهای 50 گرمی کاشته و در مرحله چهار تا شش برگی بصورت مکانیکی توسط ویروسهای cmvfny (acc.no. d00356.1) و pvyºuk (acc.no. ky112748) مایه کوبی شدند. همچنین مایه کوبی pvyº با شته به‌طور مجزا انجام شد. دو روز قبل و دو روز بعد از مایه کوبی گیاهچه های گیاه n. benthamiana، map به صورت مستقیم و به مقدار µg300 به محیط ریزوسفر در گلدان‌ها اضافه شد. آلودگی گیاه های n. benthamiana با هریک از ویروسها توسط آزمون quantitative elisa و میزان نسخه‌های ژنی pvyº توسط آزمون realtime rtpcr تا 14 روز بعد از مایه کوبی مورد ارزیابی قرار گرفت. نتایج آزمون الایزا نشان داد تیمار گیاهچه‌های n. benthamiana با map باعث کاهش معنی دار تیتر هر یک از ویروسها تا 14 روز پس از تیمار شده است. نتایج realtime pcr بیانگر کاهش میزان حضور نسخه‌های ژنوم pvyº تا 5/2 برابر در مقایسه با شاهد آلوده بود. همچنین مشخص شد پروتئینmap به میزان بیشتری باعث کنترل pvyº نسبت به cmvfny می شود. نتایج آزمون انتقال با ناقل حاکی از آن بود که map موجب کاهش انتقال pvyº با شته نمی شود. همچنین وزنهای تر و خشک اندام‌های مختلف و نیز مقدار فنل در گیاهچه های n. benthamiana تیمار شده با map افزایش نشان دادند.

the effect of mirabilis antiviral protein (map) in infections by cucumber mosaic virus (cmv) and potato virus y (pvy) in nicotiana benthamiana plants under greenhouse condition

in this study using with the mirabilis antiviral protein (map), it was attempted to explore the map controlling effect mechanism as well its antiviral activity against the cucumber mosaic virusfny (cmv) and potato virus y strain o (pvyº) under the greenhouse condition. toward this aim, map was first isolated from different fractions of the crude extracts mixture of the leaves and roots of the four o’clock plant and then nicotiana benthamiana seedlings were cultivated in 50 g pods and mechanically inoculated with the pvyouk (acc.no. ky112748) and cmvfny (acc.no. d00356.1) at 4 to 6 leaf stages. pvyo inoculation was also separately done by the aphid. map was administrated directly into the rhizosphere area of the pods at the concentration of 300 µg in two days after and two days before seedling inoculations. infection with each of the inoculated viruses in map treated benthamiana plant seedlings were then assessed by daselisa, 14 days after inoculations. using with the realtime rtpcr, pvyo transcript levels was assessed at this time. results showed that soil treatments of the benthamiana plant seedling with the map significantly decreased the titre of the tested viruses up to 14 days after treatments. results of the realtime rtpcr indicated to the significant decrease in pvyo transcript level compared with the infected control plant. it was also revealed that map is more effective in controlling pvyo compared to cmvfny. results indicated that map has not inhibited the pvyo transmission by the aphid vector. the dry and wet weights and the phenol content were also increased in benthamiana plants treated with the map.