|
|
|
|
استفاده از کروماتوگرافی مایع با عملکرد بالا مجهز به آشکارساز فرابنفش برای سنجش آمینواسیدهای آزاد در نمونه های خاک و کود
|
|
|
|
|
|
|
|
نویسنده
|
احمدی عبد بهمن ,هاشمی نسب کبرا سادات ,پایه قدر محمود ,شهبازی کریم
|
|
منبع
|
شيمي كاربردي روز - 1400 - دوره : 16 - شماره : 59 - صفحه:21 -32
|
|
چکیده
|
در این پژوهش غلظت آمینواسیدهای آزاد موثر در متابولیسم گیاهی، در نمونههای مختلف خاک و کود به روش کروماتوگرافی مایع با عملکرد بالا مجهز به آشکارساز فرابنفش اندازه‌گیری شد. ابتدا آمینواسیدها با هیدروکلریک اسید 0.1 نرمال استخراج شدند. سپس با فنیل ایزوتیوسیانات (pitc) مشتق‌سازی شد. در نهایت، مشتقات فنیل تیوکاربامیلآمینواسید در ستون فاز معکوس با استفاده از شویش گرادیانی با بافر سدیم استات تری‌هیدرات و استونیتریلآب (40:60 ]حجمی/حجمی[ ) جداسازی، و توسط آشکارساز uv در طول موج 254 نانومتر آشکارسازی شد. چندین پارامتر موثر بر جداسازی پیک آمینواسیدها از جمله ph و دمای فاز متحرک، غلظت بافر و اصلاح کننده (تری اتیل آمین) در فاز متحرک مورد مطالعه قرار گرفتند. با تغییر هر یک از شرایط موجود میزان تفکیک هر یک از آمینواسیدها بهینه‌سازی شد. تحت شرایط بهینه، گستره خطی خوبی در محدوده خطی mol/mlµ 0.125 – 0.0312 برای 17 آمینواسید با حدّ تشخیص mol/mlµ 0.0094 و تکرار پذیری قابل قبولی برای هر یک از آمینواسیدها به دست آمد (%6.1 rsd ≤). در نهایت با این روش درصد آمینواسیدهای آزاد در نمونههای مختلف خاک و کود اندازه‌گیری شد.
|
|
کلیدواژه
|
آمینواسیدهای آزاد، کروماتوگرافی مایع با عملکرد بالا مجهز به آشکارساز فرابنفش، فنیل ایزوتیوسیانات، خاک، کود
|
|
آدرس
|
دانشگاه پیام نور مرکز تهران, گروه شیمی, ایران, سازمان تحقیقات، آموزش و ترویج کشاورزی, موسسه تحقیقات خاک و آب, ایران, دانشگاه پیام نور مرکز تهران, گروه شیمی, ایران, سازمان تحقیقات، آموزش و ترویج کشاورزی, موسسه تحقیقات خاک و آب, ایران
|
|
پست الکترونیکی
|
shahbazikarim@yahoo.com
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Measurement of free amino acids in soil and fertilizer samples using high performance liquid chromatography equipped with ultraviolet detector
|
|
|
|
|
Authors
|
Ahmadi Abd Bahman ,Hasheminasab Kobra Sadat ,payehghadr Mahmood ,Shahbazi Karim
|
|
Abstract
|
In this study, the concentration of effective amino acids in plant metabolism was measured in different soil and fertilizer samples by high performance liquid chromatography. First, the amino acids of the sample were extracted with 0.1 N hydrochloric acid. Then they were derivatized with phenyl isothiocyanate (PITC). Finally, the phenylthiocarbamylamino acid derivatives were isolated in the reverse phase column using gradient elution with sodium acetate trihydrate and acetonitrilewater (40:60), and detected by a UV detector at 254 nm. Several parameters related to the separation of amino acid peaks, including pH and temperature of the mobile phase, buffer concentration and modifier (triethylamine) in the mobile phase were studied. By changing each of the existing conditions, the amount of resolution for amino acid peaks was optimized. Under optimal conditions, a good linear range (0.03120.125 µmol / ml) was obtained for 17 amino acids with a detection limit of 0.0094 µmol / ml and acceptable reproducibility for each amino acid (RSD ≤6.1%). Finally, the percentage of free amino acids was measured in different soil and fertilizer samples by this method.
|
|
Keywords
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|