تعیین فعالیت آنزیم کراتیناز توسط باکتری باسیلوس مگاتریوم سویه جدید skh14

زمینه و هدف: در جهان سالانه میلیاردها عدد مرغ مصرف می‌شود و میلیاردها تُن، پَر مرغ تولید می‌گردد. حدود 5 تا 7 درصد وزن مرغ را پَر و حدود 90 درصد از پَر را کراتین تشکیل می‌دهد. پَر، پروتئین‌ خالصی از کراتین است که بسیار نامحلول و سخت تجزیه است. برخی از باکتری‫ها توانایی تولید آنزیم کراتیناز برای تجزیه کراتین را دارند. این مطالعه با هدف تعیین عوامل موثر بر رشد باکتری باسیلوس مگاتریوم سویه skh14 جداسازی شده از خاک و اندازه گیری فعالیت آنزیمی کراتیناز انجام شد. روش کار: نمونه های خاک در ظروف استریل پلاستیکی جمع آوری گردید. تعداد 7 ایزوله باکتریایی  بر روی محیط اختصاصی پَر رشد کرده که از این تعداد، 5 ایزوله تجزیه واضحی را نشان دادند و برای تست‫های بیوشیمیایی و توالی 16s rrna و اندازه‌گیری فعالیت کراتینازی انتخاب گردیدند. سپس  این 5 باکتری‌ تعیین توالی گردیدند و  accession در بانک ژنی برای هر کدام از آنها با عنوان سویه‌ای جدید تعیین شد. 5 باکتری از نظر میزان تولید آنزیم کراتیناز مورد بررسی قرار گرفت و قوی ترین سویه از نظر تولید آنزیم کراتیناز  بهینه سازی گردید. یافته‌ها: تعداد 5 ایزوله‌ متعلق به سویه‌های مختلفی از باسیلوس‌ها بودند که هر 5 ایزوله، تجزیه کننده پَر، در زمان‫های متفاوت  بودند. بیشترین فعالیت آنزیمی مربوط به باکتری bacillus megaterium skh14  با میزان 18.01 واحد بر میلی لیتر در دقیقه و کمترین میزان مربوط  به باکتری bacillus felexus skh4  با میزان 10.81 واحد بر میلی لیتر در دقیقه گزارش گردید. نتیجه‌گیری: تجزیه پَر بوسیله ایزوله bacillus megaterium skh14 نشان داد که این باکتری قدرت پروتئازی زیادی دارد و قادر به تجزیه کراتین کامل است.

determination of keratinase enzyme activity by bacillus megatrium skh14 strain

background & objectives: billions of chickens are consumed annually in the world and about billions of tons of chicken feathers are produced. about 5 to 7 percent of the chicken’s weight is feather and about 90 percent of the feathers are keratin. feather is a pure keratin protein that is highly insoluble and difficult to break down. some bacteria have the ability to produce the keratinase enzyme to break down keratin. the aim of this study was to determine the factors affecting the growth of skh14-isolated bacilli megatrium strain skh14 and to measure the enzymatic activity of keratinase. methods: soil samples were collected in sterile plastic containers. seven bacterial isolates were grown on a specific environment, of which 5 showed clear decomposition and were selected for biochemical tests, 16s rrna sequencing and keratin measurement activity. these five bacteria were then sequenced and genebank accession number was assigned for each of them as a new strain. five bacteria were tested for keratinase production and the strongest strain was optimized for keratinase production.results: five isolates were belonged to different strains of bacilli, and all five isolates were feather decomposer at different times. the highest enzymatic activity was reported in bacillus megaterium skh14 with 18.01 units per ml and the lowest in bacillus felexus skh4 with 10.81 units per ml.conclusion: the complete decomposition of bacillus megaterium skh14 isolate showed that this bacterium has high protease activity and is able to decompose complete keratin.