بررسی ارتباط چندشکلی در اگزون 2 ژن mhc-dmb2 با پاسخ ایمنی همورال در بلدرچین ژاپنی

ژن dmb2 یکی از ژن های خوشه mhc است که در پاسخ ایمنی همورال نقش ایفا می‌کند. این تحقیق جهت شناسایی چندشکلی ناحیه اگزون 2 ژن mhcdmb2 و ارتباط آن با پاسخ ایمنی همورال در بلدرچین ژاپنی انجام گرفت. بدین منظور در روز 28 دوره پرورش، مقدار 0.2 میلی‌ لیتر محلول پنج درصد گلبول قرمز خون گوسفندی (srbc) به عضله‌ سینه 130 بلدرچین ژاپنی (65 نر و 65 ماده) تزریق شد و هفت روز بعد در روز 35 دوره پرورش، خون گیری جهت تعیین تیتر آنتی‌بادی علیه srbc  انجام شد. dna ژنومی از نمونه‏های خون استخراج شد و قطعه‏ای به اندازه 333 جفت باز از این جایگاه با استفاده از واکنش زنجیره‏ای پلی‏مراز (pcr) تکثیر شده و محصولات pcr به وسیله آنزیم برشی hinf i هضم شدند. نتایج حاصل حاکی از وجود دو نوع آلل c (333 جفت بازی) و آلل g (226 و 107 جفت بازی) در این جایگاه بود که فراوانی آن‏ها در کل جمعیت به ترتیب 74.6 و 25.4 درصد محاسبه شد.‏‏ نتایج نشان دهنده‏ وجود چندشکلی و میزان هموزیگوسیتی بالا در جمعیت مورد مطالعه است. به علاوه، نتایج نشان داد که ژنوتیپ اثر معنی داری بر تیتر آنتی‌بادی دارد (0.01 p<). ژنوتیپ cc بیشترین (2.13 میلی‌گرم بر دسی‌لیتر) و ژنوتیپ gg کمترین تیتر آنتی‌بادی کل (0.33 میلی‌گرم بر دسی‌لیتر) را نشان داد. پیشنهاد می‌شود آثار منفی این چندشکلی تک نوکلئوتیدی در برنامه‌های اصلاح‌ نژادی در نظر گرفته شود.

Investigation of the relationship between exon 2 of MHC-DMB2 polymorphism and humoral immune response in Japanese quail

The DMB2 gene is one of the MHC cluster genes that plays a role in the humoral immune response. This study was performed to identify the polymorphism of exon 2 of the MHCDMB2 gene and its association with the humoral immune response in Japanese quail. For this purpose, on day 28, 0.2 mL of 5% saline suspension of sheep red blood cell (SRBC) was injected into 130 quail’s breast muscle (65 males and 65 females). Seven days later, cervical vein blood sampling was performed on the 35th day. Afterward, the antiSRBC titer antibody was determined using a micro hemagglutination technique. Also, genomic DNA was extracted from blood samples and a 333bp fragment of exon 2 was amplified using polymerase chain reaction and PCR products were digested by Hinf 1 restriction enzyme. The results showed that there were two types of C (333bp) and G (226, 107bp) alleles in this region with a frequency of 74.6% and 26.4% in the whole population, respectively. The results indicate high polymorphism and high homozygosity in the studied population. In addition, the results showed that genotype had a significant effect on antibody titers (P<0.01). The CC genotype showed the highest total antibody titer (2.13 mg/dL) and the GG genotype showed the lowest total antibody titer (0.33 mg/dL). It is suggested that the negative effects of this single nucleotide polymorphism be considered in breeding programs.