جداسازی و شناسایی قارچ‌های میکوریزا آربوسکولار بومی در خاک‌های مناطق خشک زراعی ایران با استفاده از روش PCR آشیانه‌ای

تحقیقات نشان داده گیاهانی که ریشه آن‌ها به وسیله‌ی قارچ‌های اندوفیت میکوریزا آربوسکولار آلوده می‌شود، نسبت به گیاهان غیرمیکوریزی، توانایی بالاتری برای تحملتنش‌های زنده و غیرزنده محیطی مانند خشکی دارند. پسمطالعه گونه‌های غالب میکوریزا در مناطق خشک برای استفاده از آن‌ها به‌عنوان کود بیولوژیک می‌تواند مفید باشد. در این پژوهش ابتدا از ریشه گیاهان (گندم و جو) در مناطق تحت تنش خشکی (اراک، اصفهان، یزد، تهران، تبریز، قزوین) نمونه‌برداری شد. سپسبرای شناسایی جنس‌ها و گونه‌های میکوریزا، نواحیits-rdnaبه‌وسیله‌ی دو پرایمر اختصاصی (lsu-glom1 و ssu-glom1) و پرایمرهای عمومی قارچ‌ها (its4/its5) با تکنیک pcr آشیانه ای تکثیر شد. محصولات مثبت مرحله دوم pcr هر نمونه، همسان‌سازی شده و کلنی های مثبت با آنزیم برشیtaq1 ، هضم و الگوهای rflp نمونه‌های هضم‌شده با هم مقایسه و یک نماینده از هر الگوی برشی توالی یابی شد. نتایج مطالعات مورفولوژیک و مولکولی نشان داد که بیش از 90 درصد نمونه‌های جداسازی‌شده از جنس glomusاست. گونه‌های glomus مشاهده‌شده از طریق توالی‌یابی،glomusmosseae، glomusintraradices،fasciculatumglomus، sinuosumglomusgeosporumglomus،macrocarpumglomus،etunicatumglomus،dimorficumglomusوspglomusبود. که دو گونهetunicatumو dimorficumدر مشاهد‌ی مورفولوژیک مشخص نشده بود. نکته چشمگیر این‌است که گونه mosseaeغلبه‌‌ی کاملی در همه مناطق داشت و نتایج مولکولی نیز وجود بیش از 70 درصد از این گونه را نشان می‌داد.