بیان و تخلیص فاکتور رشد مشتق از پلاکت و ارزیابی عملکرد آن در اتصال به فیبرینوژن

فرآیند ترمیم زخم، یک فرآیند پیچیده و پویا است که انواع سلول ها و مسیرهای متابولیکی را مختلف را درگیر می کند. این فرآیند از سه فاز التهابی، تکثیر سلولی و بازسازی بافتی تشکیل شده است. بهبود موفقیت آمیز زخم به تنظیم دقیق و هماهنگی بین عوامل درگیر بستگی دارد. تا سال های اخیر استراتژی درمان های زخم های مزمن به آماده سازی زخم، برداشتن بافت نکروزه شده، کنترل عفونت و التهاب محدود می شد اما اخیرا استفاده از فاکتورهای رشد در جهت تسریع روند درمانی و بهبود زخم تایید شده اند. از اولین انواع فاکتورهای رشد نوترکیب که در درمان زخم های دیابتی به تایید رسیده است، فاکتور رشد نوترکیب انسانی pdgf-bb می‌باشد. مطالعات مختلف گزارش کرده است که pdgf به عنوان یک واسطه ی مهم در بهبود زخم در تسریع بهبودی، بهبود التهاب، تکثیر سلولی، رگزایی و بازسازی بافت کمک می کند. در این مطالعه، توالی ژن pdgf-b انسانی، جهت کلون کردن در وکتور بیانی pet 21(a+) قرار گرفت و سپس برای بیان آن در میزبان e.coli shuffle تحت پروموتور t7 وارد شد. خالص سازی پس از بیان با استفاده از ستون نیکل آگارز انجام شد و جهت بررسی فعالیت پروتئین تخلیص شده، آزمایش های تکثیر سلولی، مهاجرت و اتصال به پروتئین ماتریکس خارج سلولی بررسی شد. نتایج حاصل از این مطالعه نشان داد که نوع دیمر pdgf بیان و تخلیص شده در میزبان باکتریایی احتمالا بدلیل حفظ ساختار فولد شده صحیح، دارای هر دو فعالیت اصلی یعنی تکثیر سلولی بدلیل اتصال فعال به گیرنده سلولی و همچنین قابلیت اتصال به فیبرینوژن را حفظ کرده است. 

expression and purification of platelet-derived growth factor and evaluation of its function in binding to fibrinogen

the wound healing process is a complex and dynamic process that involves many metabolic pathways. this process consists of three phases inflammation, cell proliferation, and tissue regeneration stages. successful wound healing depends on careful regulation and coordination between the factors involved. until recent years, the strategy of treating chronic wounds was limited to wound preparation, removal of necrotic tissue, and control of infection and inflammation, but recently the use of growth factors has been approved to accelerate the healing process and heal the wound. human recombinant growth factor pdgf-bb is one of the first types of recombinant growth factors approved in treating diabetic wounds. several studies have reported that pdgf is an important mediator in wound healing that helps to accelerate healing, improve inflammation, cell proliferation, angiogenesis, and tissue regeneration. in this study, the human pdgf-b gene sequence was inserted into the pet 21a (+) expression vector for cloning and then inserted under the t7 promoter for its expression in the e. coli shuffle host. purification was done using a nickel agarose column and to check the activity of the purified protein, cell proliferation, migration, and interaction were checked. the results of this study showed that the dimer type of pdgf expressed and purified in the bacterial host, probably due to maintaining the correct folded structure, has both main activities, i.e., cell proliferation due to the active binding to the cell receptor, as well as the ability to bind to fibrinogen.