تولید ماهی کایمر حاصل از پیوند درون صفاقی سلول‌های بنیادی اسپرماتوگونی ماهی آزاد دریای خزر(salmo caspius) به آلوین های تازه تفریخ شده قزل‌آلای رنگین کمان (oncorhynchus mykiss)

سلول های بنیادی اسپرماتوگونی (sscs) سلول های منحصر به فردی هستند که قادرند اطلاعات ژنتیکی را به بعد منتقل کنند؛ ازاین رو در تولید کایمرهای بینِ گونه ای نقش مهمی بازی میکنند. بنابراین، این مطالعه با هدف تولید ماهی کایمر حاصل از پیوند درون صفاقی sscs ماهی آزاد دریای خزر به آلوین های تازه تفریخ شده قزل آلای رنگین کمان انجام شد. سلول های اسپرماتوگونی از بافت بیضه ماهی آزاد هشت ماهه با روش هضم آنزیمی استخراج شدند. سلول ها بعد از جداسازی و رنگ آمیزی با رنگ فلورسنت غشایی pkh26 به حفره صفاقی آلوین های تازه تفریخ شده قزل آلای رنگین کمان پیوند شدند. آلوین ها 15 و 30 روز پس از پیوند بااستفاده از میکروسکوپ فلورسنت بررسی شدند. 180 روز پس از پیوند، گناد ماهیان پیوندشده برای آنالیزهای مولکولی استخراج شدند. سلول های پیوندشده به سمت گناد در حال تکوین قزل آلای رنگین کمان مهاجرت و کلون زایی کردند. حضور سلول های ماهی آزاد دریای خزر در 41/4 درصد از گناد ماهیان قزل آلای رنگین کمان با استفاده از pcr تایید شد. نتایج این مطالعه برای اولین بار پیوند موفقیت آمیز بینِ گونه ای را در قزل آلای رنگین کمان نشان داد. این مطالعه نشان داد که سلولهای سوماتیک قزل آلای رنگین کمان قادرند سلول های اسپرماتوگونی ماهی آزاد دریای خزر را حمایت کنند. پیوند بین گونه ای سلولهای اسپرماتوگونی دریچه جدیدی برای حفاظت نژادهای کمیاب و گونه های در معرض تهدید گشوده است بنابراین، پیوند sscs به عنوان یک روش کاربردی برای حفاظت ذخایر ژنتیکی این گونۀ با ارزش پیشنهاد می شود.

chimera production by intraperitoneal transplantation ofcaspian brown trout (salmo caspius) spermatogonial stem cells into rainbow trout (oncorhynchus mykiss) alevins

spermatogonial stem cells (sscs) are unique with an important role in the transmission of genetic information to the next generation. thus, they play an important role for the production of interspecies germ line chimeras. therefore, the objective of this study was to produce chimera through the intraperitoneal transplantation of caspian brown trout sscs into newly-hatched rainbow trout. spermatogonial cell were isolated from the testes of 8-month-old caspian brown trout through enzymatic digestion. the spermatogonial cell suspension was enriched using differential plating technique to remove testicular somatic cells. after culturing for 48 h in l15 supplemented with 10% serum, suspended cells were collected and stained with the fluorescent membrane dye pkh26. the stained cells were intraperitoneally transplanted into triploid rainbow trout hatchlings. at 15 and 30 days after transplantation, the recipients were investigated under a fluorescent microscope. the gonads of recipients were dissected for molecular analysis at 180 days after transplantation. transplanted spermatogonial cells migrated toward and incorporated into recipient genital ridges. the presence of the caspian brown trout genetic material was confirmed by pcr in 41.4% of the rainbow trout testes. these results demonstrated for the first time that the interspecies spermatogonial transplantation was successful in rainbow trout and that the somatic microenvironment of the rainbow trout gonad can support the colonization and survival of intraperitoneally transplanted cells derived from a fish species belonging to a different genus. therefore, the sscs transplantation can be used as a tool for conservation of caspian brown trout genetic resources.