بررسی اثر باکتریوفاژ M13 و پپتید Rgd در القای آنژیوژنز و پتانسیل ترمیم سلول‌های فیبروبلاستی غدد لنفی موشی

اهداف: یکی از مهم‌ترین اهداف پزشکی بازساختی، تولید بافت‌های جایگزین با عملکرد صحیح است. سلول‌های فیبروبلاستی یکی از مهم‌ترین انواع سلول‌ها در فرآیند ترمیم هستند که در تشکیل عروق خونی نیز نقش دارند. تحریک سلول‌های فیبروبلاستی برای شروع تکثیر و فراخوان دیگر سلول‌ها و همچنین آنژیوژنز نیاز به سیگنال‌های بیرونی مناسب دارد. هدف از مطالعه حاضر بررسی اثرات باکتریوفاژ m13 در ترکیب با پپتید rgd روی سلول‌های فیبروبلاستی است.مواد و روش‌ها: برای این مطالعات، ابتدا باکتریوفاژ m13 تکثیر و جداسازی شد. سپس پپتید rgd سنتز و خالص‌سازی شد در ادامه سلول‌های فیبروبلاستی جداسازی‌شده از موش، روی سطوح پوشش داده‌شده با باکتریوفاژ m13، باکتریوفاژ m13 و rgd، ژلاتین و سطوح کنترل به‌مدت 48ساعت کشت داده شد. سپس برای اندازه‌گیری میزان تکثیر و بقای سلول‌ها تست mtt صورت گرفت و پس از آن میزان بیان ژن‌های fgf-2، tgf- β1 و vegf-a به‌وسیله واکنش زنجیره‌ای پلیمراز در زمان واقعی (real-time pcr) اندازه‌گیری شدیافته‌ها: نتایج مطالعه حاضر نشان داد که سطح باکتریوفاژ m13 و rgd موجب افزایش تکثیر سلولی و میزان زنده‌ماندن سلول‌های فیبروبلاست گشته است. علاوه بر این، بیان ژن‌های fgf-2، tgf-β1 و vegf-a در سلول‌های فیبروبلاست کشت داده‌شده روی سطح باکتریوفاژ m13 و rgd به‌طور معنی‌دار افزایش یافت.نتیجه‌گیری: تحقیق حاضر نشان داد که داربست‌هایی از جنس باکتریوفاژ m13 و پپتید rgd به‌دلیل عدم سمیت و زیست‌سازگاربودن می‌توانند کاندید مناسبی برای القای ترمیم و آنژیوژنز در مهندسی بافت باشند.

Evolution of M13 Bacteriophage and RGD Peptide Effects on Induction of Angiogenesis and Regenerative Potential of Mouse Primary Lymph Node Fibroblasts

Aims: One of the most important regenerative medical purposes is the production of alternative tissues with proper function. Fibroblast cells are one of the most important types of cells in the repair process that also play a role in the formation of blood vessels. Stimulation of fibroblastic cells requires the appearance of external signals to begin the proliferation and recall of other cells, as well as angiogenesis. The aim of this study was to investigate the effects of M13 in combination with RGD peptide on fibroblastic cells.Materials and Methods: For this study, M13 bacteriophage was first amplified and isolated. Then RGD peptide was synthesized and purified. Then, isolated mouse fibroblastic cells were culture on surfaces coated with M13 bacteriophage, bacteriophage M13 and RGD, gelatin, and surfaces without coated as a control for 48 hours. MTT assay was used to measure the proliferation and survival of cells, and then the expression of FGF2, TGF beta;1 and VEGFA genes was measured by realtime PCR.Findings: The results of this study showed that the M13 and RGD bacteriophage increased cell proliferation and the fibroblast cell survival rate. In addition, expression of FGF2, TGF beta;1 and VEGFA genes in cultured fibroblasts on the M13 and RGD bacteriophages surface increased significantly.Conclusion: Our research showed that scaffolds of M13 bacteriophage and RGD peptide are nontoxic and biocompatible so they can be a suitable candidate for induction of repair and angiogenesis in tissue engineering.