القای آپوپتوز در سلول‌های گلیوما به‌وسیله مهار ژن Hif-1α

اهداف: فاکتور رونویسی hif1، یک عامل تعیین‌کننده کلیدی در تنظیم ژن وابسته به اکسیژن است که نقش آن برای بقا و پیشرفت تومورهای سرطانی به اثبات رسیده است. بررسی تاثیر سرکوب hif-1α برای بررسی فرآیندهای وابسته hif1 و تداخل با حوادث پاتوفیزیولوژیک ناشی از هیپوکسی اهمیت دارد. هدف پژوهش حاضر القای آپوپتوز در سلول‌های گلیوما به‌وسیله مهار ژن hif-1α بود.مواد و روش‌ها: در این پژوهش تجربی، sirna اختصاصی علیه ژن hif-1α از سرورهای oligowalk وmit (sirna.wi.mit.edu) و بخش طراحی آنلاین شرکت‌های invivogene و qiagene طراحی شد و کارآیی خاموش‌سازی آن در رده سلولی گلیومای u87 به‌وسیله تکنیک ریل‌تایم پی‌سی‌آر به‌صورت کمَی مورد بررسی قرار گرفت. برای پی‌بردن به تاثیر کاهش بیان در روند چرخه سلولی و آپوپتوز، رنگ‌آمیزی با pi و انکسین pi انجام و با تکنیک فلوسایتومتری، تعداد سلول‌ها در هر فاز و میزان مرگ‌ومیر سلولی با کنترل مقایسه شد.یافته‌ها: sirna اختصاصی طراحی‌شده برای ژن hif-1α قادر به کاهش بیان ژن به میزان 40% بود. تیمار سلول‌های u87 پس از 24 ساعت سبب افزایش 6% سلول‌ها و پس از 48 ساعت، سبب 12% افزایش سلول‌ها در مرحله sub g1 شد. در تایید تغییرات چرخه سلولی، تیمار 48ساعته، سبب القای آپوپتوز در 58% سلول‌ها شد که با توجه به میزان 1/5درصدی آپوپتوز در سلول‌های کنترل، این مقدار مرگ سلولی بسیار چشمگیر بود و توانایی sirna طراحی‌شده را در القای آپوپتوز نشان داد.نتیجه‌گیری: القای آپوپتوز با sirna اختصاصی طراحی‌شده علیه ژن hif-1α بر کاهش بیان ژن hif-1α، روند رشد سلول‌ها و افزایش آپوپتوز تاثیر قابل ملاحظه‌ای دارد.