|
|
شناسایی سریع باکتری ویبریو کلرا با استفاده از واکنش زنجیرهای پلیمراز ششگانه (Hexaplex PCR)
|
|
|
|
|
نویسنده
|
زینالدینی مهدی ,سعیدی نیا علیرضا ,صادقی وحید
|
منبع
|
طب انتظامي - 1393 - دوره : 3 - شماره : 2 - صفحه:77 -84
|
چکیده
|
مقدمه: ویبریو کلرا (عامل بیماری وبا) یک پاتوژن مهم در بروز بیماری اسهال در بخشهای گستردهای از آسیا و آفریقا است. این باکتری یک پاتوژن رودهای است که میتواند سبب بروز بیماری همهگیر گردد. درنتیجه تشخیص سریع، حساس و اختصاصی ویبریو کلرا، مورد توجه اکثر آزمایشگاههای تشخیصی است. هدف از این پژوهش، طراحی و توسعه یک روش سنجش سریع ژنوم باکتری ویبریو کلرا بر اساس واکنش زنجیرهای پلیمراز ششگانه (hexaplex pcr) است. مواد و روشها: پرایمر جهت شناسایی شش ژن بیماریزا و تنظیمی از باکتری ویبریو کلرا انجام شد. ژنهای مذکور شامل ژنهای کلرا توکسین زیر واحدهای a و (ctxa, ctxb) b، توکسین zot، انتروتوکسین کلرا (ace)، توکسین تنظیمی (tcp) و پروتیین غشا خارجی (ompw) است. ژنوم نمونه استاندارد، با استفاده از پرایمرهای مذکور در واکنش زنجیرهای پلیمراز ششگانه، مورد مطالعه قرار گرفت. همچنین حساسیت و اختصاصیت سنجش مذکور نیز ارزیابی شد. یافتهها: انجام pcr ششتایی، حضور ژنهای بیماریزا و تنظیمی باکتری ویبریو کلرا را در نمونه استاندارد نشان داد. همچنین نتایج بیانگر اختصاصیت مناسب روش بوده و حساسیت آن تا حدود cfu 100 از باکتری محاسبه گردید. نتیجهگیری: از روش واکنش زنجیرهای پلیمراز ششگانه میتوان برای طراحی کیت تشخیصی عامل بیماری وبا استفاده نمود.
|
کلیدواژه
|
ویبریو کلرا ,PCR ,حساسیت ,اختصاصیت ,vibrio cholerae ,detection ,specificity ,sensitivity
|
آدرس
|
دانشگاه صنعتی مالک اشتر, ایران, دانشگاه صنعتی مالک اشتر, ایران, دانشگاه صنعتی مالک اشتر, ایران
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Authors
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|