بررسی ایمنوشیمی و عملکرد استیل ترانسفراز مخمری (AYT1) در سمزدایی مایکوتوکسین دیاکسی نیوالنول در گیاهان توتون تراریخت

بیماری بلایت فوزاریومی سنبله گندم (fusarium head blight, fhb) که بهوسیله قارچ fusarium graminearum ایجاد میشود، قادر است علاوه بر کاهش چشمگیر عملکرد، خسارت غیرمستقیمی را نیز از طریق تجمع مایکوتوکسین‌ها (تریکوتسین‌ها) در دانه‌های برداشت‌شده وارد سازد که محصول را برای تغذیه انسان و دام نامناسب می‌نماید. تریکوتسین‌ها (مانند دی‌اکسی نیوالنول یا don) ممانعت‌کنندگان سنتز پروتیین در یوکاریوت‌ها می‌باشند. محصول ژن ayt1 در مخمر s. cerevisiaeتوانایی 3-o- استیلاسیون تریکوتسین‌ها را داراست و می‌تواند don را به فرم استیله که از سمیت پایین‌تری برخوردار است تبدیل کند. استیلاسیون یکی از مکانیسم‌های سم‌زدایی و ایجاد مقاومت به مایکوتوکسین‌هاست، در این مطالعه ژن ayt1 (استیل ترانس فراز مخمری) با استفاده از آگروباکتریوم به گیاه مدل توتون انتقال داده شد تا امکان ایجاد مقاومت نسبی به این بیماری مورد بررسی قرار گیرد. به‌منظور سهولت پیگیری بیان تراژن مذکور اپی‌توپ c-myc با استفاده از تکنیک pcr-tagging به آن افزوده شد. پس از آنالیزهای مولکولی و تایید تراریختی، مطالعات ایمنولوژیک با روش‌های لکه‌گذاری و الیزا بر روی لاین‌های تراریخت برای بررسی بیان ayt1-cmyc1 انجام شد. علاوه بر آن فعالیت استیل‌ ترانسفرازی تراژن مذکور بر روی don با تکنیک کروماتوگرافی لایه نازک مشاهده شد. گیاهان تراریخت تحمل نسبی به غلظت ppm10 مایکوتوکسین در ارزیابی‌های درون‌شیشه‌ای نشان دادند.