ترانسفورماسیون پایدار و آسان جنین بالغ برنج (Oryza sativa L.) با استفاده از روش in planta

ترانسفورماسیون ژنتیکی برنج با استفاده از آگروباکتریوم (agrobacterium tumefaciens) رویکردی مطلوب، ضروری و قدرتمند برای انتقال‌ژن به گیاهان زراعی می باشد. در این پژوهش بهمنظور ترانسفورماسیون گیاهان برنج از روش in planta استفاده شد. بر این اساس، بذور برنج بهمدت دو روز خیسانده شدند و سپس سمت مریستم انتهایی بذر که جنین بالغ برنج وجود دارد، در مراحل اولیه جوانه زنی با سوزن آغشته به محلول آگروباکتریوم زخم‌زنی و تلقیح شد. آزمایش با دو سویه آگروباکتریوم (eha105 و lba4404) حاوی پلاسمید pcambial105.1r، سه غلظت استوسیرینگون (m?200، 100 و 0)، سه رقم برنج (هاشمی، حسنی و غریب) و دو روش وکیوم و بدون وکیوم بهصورت فاکتوریل و در قالب طرح کاملاً تصادفی در سه تکرار انجام شد. کارایی ترانسفورماسیون با استفاده از آزمون مقاومت بافت های برگی به آنتی‎بیوتیک هایگرومایسین، آزمون بافت شیمیایی gus و واکنش pcr با حداقل سه ژن مختلف بررسی شد. در نهایت، سویه eha105 در رقم هاشمی، با حضور m?100 استوسرینگون همراه با استفاده از وکیوم بالاترین کارایی ترانسفورماسیون (46/37%) را نشان دادند. پایداری ترانس ژن در نسل بعد بررسی و به این‌منظور 60 گیاه از نسل t1 با استفاده از سه تست اشاره‌شده آزمون و ترانسفورماسیونبودن 21% آن‌ها تایید شد.