همسانه سازی و بیان پپتید ضدمیکروبی امیگانان پنتاهیدروکلراید (mbi226) در توتون (nicotiana tabacum) به منظور ایجاد مقاومت به باکتری‌های بیماری‌زا

پپتیدهای ضدمیکروبی، مولکول‌های قدیمی و حفاظت شده‌ هستند که در مکانیسم‌های دفاعی موجودات زنده مانند باکتری‌ها، جانوران و گیاهان دیده می‌شوند. شناسایی و معرفی پپتیدهای ضدمیکروبی جدید، روشی مقرون به صرفه برای مقابله با میکروب‌های بیماری‌زا و همچنین بهبود مقاومت گونه‌های گیاهان زراعی با استفاده از تکنولوژی dna نوترکیب است. به این منظور یک سازه ژنی حاوی توالی ژن کد کننده پپتید ضدمیکروبی امیگانان (omiganan) نوتروفیل گاو پس از همسانه‌سازی به کمک اگروباکتریویوم تومفاشینز به دیسک‌های برگی توتون انتقال داده شد. با روش pcr حضور ژن کد کننده پپتید ضدمیکروبی در ژنوم گیاهان تراریخت اثبات و تعداد 6 گیاه تراریخت به همراه شاهد انتخاب شدند. پروتئین کل استخراج و از آن برای کنترل رشد برخی باکتری‌های مهم انسانی مثل؛ e.coli ، staphylococcus aureus و bacillus cereus و همچنین برخی باکتری‌های گیاهی مانند xanthomonas campestris و pseudomonas aeruginosa به روش دیسک و تشکیل هاله مهار کننده استفاده شد. نتایج نشان داد که پروتئین کل گیاهان تراریخت در مقایسه با گیاه غیرتراریخت، به‌طور معنی‌داری (p<0/05)مانع رشد بیشتر باکتری ها شد. تفاوت معنی داری(p<0/05) بین گیاهان تراریخت از نظر میزان تاثیر روی باکتری ها مشاهد شد. بر خلاف باکتری های گرم منفی، حضور پپتید امیگانان تاثیر معنی داری(p<0/05) روی باکترهای گرم مثبت نداشت، اما تاثیر معنی داری(p<0/05) در کنترل رشد پاتوژن های گیاهی داشت. بنابراین با بیان پپتید امیگانان در گیاه و خالص سازی آن، می توان با استفاده از فرمولاسیون های دارویی از آن به عنوان ضد باکتری استفاده کرد. همچنین با بیان این پپتید در گیاهان زراعی، می توان گیاهان مقاوم به عوامل بیماری زا تولید نمود.