بهینه‌سازی عوامل موثر در انتقال ژن fad3 موثر در بیوسنتز امگا 3 به دو رقم کنجد

مقادیر بالای اسیدهای چرب غیراشباع امگا 6 و نسبت بسیار بالای امگا 6 به امگا 3 باعث بیماری های بسیاری از جمله بیماری های قلبی عروقی، سرطان و بیماری های التهابی و خودایمنی می شود. برای انتقال موفق یک ژن به گیاه، به بهینه‌سازی انتقال ژن نیاز است. کنجد یک گیاه دانه روغنی قدیمی است که به‌دلیل داشتن لیگنان‌های مهم دارویی و همچنین روغن خوراکی با کیفیت شهرت دارد. افزایش امگا 3 در این گیاه تا اندازه زیادی به بهبود کیفیت روغن آن کمک می‌کند. در این پژوهش جهت بهینه‌سازی شرایط انتقال ژن fad3 جدا شده از گیاه کتان به گیاه کنجد اثرات رقم (داراب و دشتستان)، مدت زمان پیش کشتی (5، 6 و 7 روزه)، غلظت اگروباکتریوم (1 و 0.5، 0.25 =od600)، مدت زمان تلقیح (10، 20 و 30 دقیقه)، مدت زمان هم کشتی (صفر، 24، 48 و 72 ساعت) و شرایط نوری (تاریکی و 16 ساعت روشنایی) وغلظت استوسیرینگون (0، 50 و 100 میکرومولار) هر کدام به‌صورت جداگانه در قالب طرح کاملاً تصادفی در 4 تکرار بررسی شد. نتایج نشان داد که ریزنمونه‌های 7 روزه در رقم دشتستان و ریزنمونه‌های 5 روزه در رقم داراب، غلظت اگروباکتریوم od600=1، مدت زمان تلقیح 30 دقیقه، مدت زمان همکشتی 24 ساعت در تاریکی و غلطت استوسیرنگون 100 میکرومولار نقش مهمی در کارایی انتقال ژن دارند. در این پژوهش رقم دشتستان درصد باززایی بهتری را نسبت به رقم داراب نشان داد. در نهایت گیاهچه‌های باززا شده به محیط ریشه‌زایی منتقل شدند. بررسی اولیه گیاهان باززا شده در محیط انتخابی انجام شد و آزمایشpcr  با استفاده از پرایمرهای اختصاصی انجام گشت و گیاهان تراریخته انتخاب شدند.

optimization of effective factors in the transfer of fad3 gene effective in omega-3 biosynthesis to two sesame cultivars

excessive amounts of omega-6 polyunsaturated fatty acids and a very high omega-6/omega-3 ratio, promote the pathogenesis of many diseases, including cardiovascular disease, cancer, inflammatory and autoimmune diseases. for the successful transfer of a gene to a plant, gene transfer optimization is needed. sesame is an ancient oilseed plant known for its medicinally important lignans and its high quality edible oil. the increase of omega 3 in this plant helps to improve the quality of the oil.  in this research, in order to optimize the transfer conditions of fad3 gene isolated from flax plant to sesame plant, the effects of cultivar (darab and dashtestan), pre-culture time (5, 6 and 7 days), agrobacterium concentration (0.1, 0.5, 0.25 od600), inoculation time (10, 20 and 30 minutes), co-cultivation time (zero, 24, 48 and 72 hours) and light effect (darkness and 16 hours of light) and acetosyringone concentration (0, 50 and 100 µm)) were investigated separately in a completely randomized design in 4 replications. the results showed that the 7-day pre-culture duration in the dashtestan variety and 5-day pre-culture duration in the darab variety, agrobacterium concentration od600= 1, inoculation time of 30 minutes, co-culture time of 24 hours in the dark and 100 μm acetosyringone had an important role in gene transfer efficiency. in this study, the dashtestan cultivar showed a better regeneration percentage than the darab cultivar. finally, shoots were transferred into rooting media. preliminary investigations of regenerated plants in the selected environment and pcr tests were done using specific primers and transgenic plants were selected.