مطالعه جهش‌های ژن b4galnt2 (fecl) با روش تجزیه نقطه ذوب با وضوح بالا(hrm) در گوسفند زندی

از معیار‌های مهم بررسی توان تولیدمثل، تعداد نتاج متولد شده در هر زایمان می‌باشد. با توجه به تاثیر این صفت در سودمندی گله‌ها، بهبود ژنتیکی آن به‌کمک فناوری های مولکولی مورد توجه قرار گرفته است. تحقیقات نشان داده است که ژن‌های عمده اثر شامل gdf9, bmp15, alk6 و b4galnt2 (fecl) با صفت تعداد نتاج در هر زایش مرتبط بوده‌اند. تاثیر جهش ژن fecl در حالت هموزیگوت به‌صورت افزایشی بوده و منجر به آزاد شدن سه تخمک برای دو کپی از این ژن می شود. هدف از این مطالعه بررسی چندشکلی  dlx3: c. * 803a>gدر شناسایی ژن b4galnt2 (fecl) روی کروروموزم 11 با استفاده از روش ذوب با وضوح بالا (hrm)، در گوسفند زندی و ارتباط این ژن با صفت چند قلوزایی بود. آنالیز hrm روشی است که میزان کاهش فلورسنت را در طی فرآیند شیب حرارتی ذوب dna در اثر خروج رنگ اندازه‌گیری می‌نماید. نتایج حاصل از hrm با نتایج تعیین توالی در تطابق کامل بود. هیچ‌گونه تغییری در توالی نوکلئوتیدی جایگاه مورد نظر در جمعیت گوسفند زندی مورد بررسی مشاهده نشد، از این رو مکان مورد بررسی برای ژن b4galnt2 یک شکل (مونومورف) می‌باشد. ما در تمامی توالی‌های مورد نظر تغییرات نوکلئوتیدی به‌صورت حذف را مشاهده کردیم، اما تغییری در آمینواسید حاصل و در نتیجه تغییری در ساختار پروتئین حاصل نشد. به‌علاوه دو جهش شامل جهش a>g در جایگاه 2242در نمونه 7 و جهش c>g در جایگاه 2241 در نمونه 77 مشاهده شد. بررسی جهش در ژن‌های عمده اثر دیگری برای این نژاد پیشنهاد می شود.

study of b4galnt2 (fecl) gene mutation by using high resolution melting (hrm) technique in zandi sheep

litter size is one of the most important reproductive criteria in animals. hence, the effect of this trait on the productivity of the flock has been addressed by its genetic enhancement through molecular technologies. previous studies have shown that the major genes including gdf9, bmp15, alk6, and b4galnt2 (fecl) are associated with litter size. the effect of fecl mutation in homozygous states is additive and results in the release of three ovum for two copies of this gene. the aim of this study was to investigate polymorphism dlx3: c. * 803a> g in b4galnt2 (fecl) gene on chromosome 11, using high resolution melting technique (hrm), and it is association with litter size in zandi sheep. hrm analysis is a method that reduces the amount of fluorescence during the process of thermal melting of the dna through color exhaust. the results of hrm were consistent with the sequencing results. no mutations were observed in the nucleotide sequence of the target studied in the zandi sheep. therefore, b4galnt2 gene is monomorphic for this site length in 232bp fragment of this gene. we discovered many deletions, but there was no change in the resulting amino acid. therefore, that did not result in structural alteration of the protein. in addition, two new mutations included a> g mutation at position 2242 in sample 7 and mutation c> g at position 2241 in sample 77 were detected. it seems necessary to investigate mutations in other major genes for this breed