بیان ژنGyri درموتان های مقاوم به سیپروفلوکسازین در E. Coli پس از تیمار با سیپروفلوکسازین

گسترش مقاومت در باکتری‌های گرم‌منفی به‌خصوص سویه‌های بیماری‌زا اشریشیا کلی، موجب کاهش اثر‌بخشی آنتی‌بیوتیک‌ها از جمله سیپروفلوکسازین در درمان بیماری‌های عفونی شده‌است. هدف‌ مهم این آنتی‌بیوتیک‌ در ‌باکتری اشریشیا کلی، dna‌‌جیراز است. یکی از مهار‌کننده‌هایdna ‌جیراز پروتئین gyri است که با اتصال بهdna ‌جیراز مانع از اتصال سیپروفلوکسازین به این آنزیم می شود. بنابراین هدف از این مطالعه بررسی بیان ژن gyri درموتان مقاوم به سیپروفلوکسازین در باکتری اشریشیا کلی بود. برای بررسی بیان ژن ابتدا rna سلول در مرحله‌ی نمایی‌رشد استخراج شد و پس‌از سنتزcdna میزان بیان این ژن در موتان مقاوم به سیپروفلوکسازین در مقایسه با سویه‌ی تیپ وحشی با روشreal time pcr اندازه‌گیری شد. نتایج حاصل ازreal time pcr نشان داد که ژن gyri در موتان مقاوم به سیپروفلوکسازین در فاز نمایی رشد افزایش بیان دارد. افزایش بیان ژن gyri در حضور و عدم حضور سیپروفلوکسازین نسبت به بیان این ژن در سویه تیپ وحشی معنی‌دار بود (p<0.05). افزایش بیان این ژن در عدم حضور و در حضور سیپروفلوکسازین در موتان مقاوم تقریبا به‌ترتیب 8 و 63 برابر مقدار بیان شده در سویه‌ی تیپ وحشی بود. در نتیجه به‌نظر می‌رسد که در موتان مقاوم به سیپروفلوکسازین بیش بیانی پروتئین gyri در فاز نمایی رشد مخصوصاً در حضور سیپروفلوکسازین عامل مهمی در مهار آنزیم‌‌dna جیراز و مقاومت به سیپروفلوکسازین باشد.

The expression of gyrI in ciprofloxacin resistant mutant of E. coli following treatment with ciprofloxacin

The spread of resistance to gramnegative bacteria, especially strains of Escherichia coli, has reduced the effectiveness of antibiotics, including ciprofloxacin in the treatment of infectious diseases. The main target of this antibiotic in Escherichia coli is DNA gyrase. GyrI is one of the inhibitors of DNA gyrase that binds to DNA gyrase to prevent the binding of ciprofloxacin. Therefore, the aim of this study was to investigate the expression of gyrI in a ciprofloxacin resistant mutant of Escherichia coli following treatment with ciprofloxacin. To evaluate gyrI expression, cell RNA was extracted at the exponential phase of growth and after cDNA synthesis, gyrI gene expression of ciprofloxacin resistant mutant was measured as compared to wild type strain by Real Time PCR. The results of Real Time PCR showed that the expression of gyrI gene was increased in ciprofloxacin resistant mutant in exponential phase of growth. Increased expression of gyrI in presence and absence of ciprofloxacin in comparison to the wild type strain was significant (P<0.05). Increased expression of this gene in presence and absence of ciprofloxacin in the mutant cell was 63 and 8 times of that in wild type strain, respectively. In conclusion, it seems that in ciprofloxacin resistant mutant GyrI overexpression in exponential phase of growth especially in the presence of ciprofloxacin is an important factor in DNA gyrase inhibition and resistance to ciprofloxacin.