unleashing monoclonal antibodies: targeting covid-19’s nucleocapsid protein and spike antigens

Since the end of 2019, the severe acute respiratory syndrome coronavirus 2 (sars-cov-2) has infected many people globally. diagnosis and treatment of patients have a pivotal role in surviving them. two units of virus namely, nucleocapsid protein and spike proteins play important roles in entering and affecting cells. these two substances can be good targets for producing monoclonal antibodies which can be useful in treatment, serological diagnosis tests, and even prevention by vaccination.the nucleocapsid protein and spike proteins of sars‐cov‐2 were purchased by razi vaccine and research institue in karaj in 2020. then they were separately injected into mice with appropriate dosage of adjuvants. the spleen cells of immunized mice were fused with myeloma cells. the best antibody producer clones were opted for further evaluation tests. western blot and elisa were used to demonstrate the immunoreactivity of the recombinant np and s proteins. finally, we freeze the best clones in nitrogen.by using an elisa test, eight clone antibodies namely, 3g1, 3g2, 3e7, h11, a11, f10, b11, and 2f6 were identified. these monoclonal antibodies were found to be against the s and n p antigens of sars-cov-2. additionally, the results of the western blot test indicated that each of these antibodies had antigenic sites against spike and nucleocapsid protein independently, and the isotyping test revealed that they were from igg (2a, 2b) or igm class antibodies.the development of monoclonal antibodies has the potential to help in both diagnosis and treatment. the nucleocapsid protein and spike protein from sars-cov-2 exhibit a great deal of promise for creating a new generation of monoclonal antibodies. moreover, a thorough method for the early diagnosis of covid-19 can be offered by combining the detection of nucleocapsid protein and spike proteins..

طراحی و تولید آنتی بادی های مونوکلونال با هدف قرار دادن آنتی ژن های nucleocapsid و spike

چکیدهاز ابتدای سال 2020، ویروس سندرم حاد تنفسی ویروس کرونا 2 (sars-cov-2) بسیاری از افراد را در سراسر جهان آلوده کرده است. تشخیص و درمان بیماران نقش اساسی در بقای انسان ها دارد. دو آنتی ژن ویروس یعنی پروتئین نوکلئوکپسید و پروتئین اسپایک نقش مهمی در ورود به سلولها را دارند. این دو ماده می توانند اهداف خوبی برای تولید آنتی بادی های مونوکلونال باشند که می توانند در درمان، تست های تشخیص سرولوژیکی و حتی پیشگیری از طریق واکسیناسیون مفید باشند.مواد و روش هاپروتئین نوکلئوکپسید و پروتئین های اسپایک sars-cov-2 خریداری شد. سپس آنها به طور جداگانه با دوز مناسب از ادجوانت به موش تزریق شد. سلول های طحال موش های واکسینه شده با سلول های میلوما ادغام شدند. بهترین کلون های تولید کننده آنتی بادی برای آزمایش های ارزیابی بیشتر انتخاب شدند. از وسترن بلات و الایزا برای نشان دادن واکنش های ایمونولوژیک آنتی بادی های مونوکلونال علیه پروتئین های نوترکیب np و s استفاده شد. در نهایت بهترین کلون ها را در نیتروژن منجمد کردیم.نتایجبا استفاده از آزمون الایزا، هشت کلون آنتی بادی به نام‌های 3g1، 3g2، 3e7، h11، a11، f10، b11 و 2f6 شناسایی شدند. مشخص شد که این آنتی بادی های مونوکلونال علیه آنتی ژن های s و np هستند. علاوه بر این، نتایج آزمایش وسترن بلات نشان داد که هر یک از این آنتی‌بادی‌ها به‌طور مستقل دارای جایگاه‌های آنتی ژنی علیه پروتئین spike و nucleocapsid هستند و آزمایش ایزوتایپ نشان داد که آنها از آنتی‌بادی‌های تولید شده از کلاس igg (2a, 2b) یا igm هستند.نتیجهتوسعه آنتی بادی های مونوکلونال پتانسیل کمک به تشخیص و درمان را دارد. پروتئین نوکلئوکپسید و پروتئین‌های اسپایک از sars-cov-2 نوید زیادی برای ایجاد نسل جدیدی از آنتی‌بادی‌های مونوکلونال نشان می‌دهند. علاوه بر این، این آنتی بادی ها میتوانند کمک شایانی به تشخیص زودهنگام covid-19 به وسیله تکنیک الایزا انجام دهند.