recombinant fusion protein lipl41-ompl1 as a potential candidate for a cost-effective vaccine against leptospirosis

Leptospirosis represents a significant threat to the health of both humans and animals. it is a disease caused by pathogenic leptospira. the early detection of pathogenic leptospira is an effective method for preventing a multitude of potential complications. the protected outer membrane protein (omp) of pathogenic leptospira, lipl41-ompl1, was inserted into e. coli bacteria using different software for the amino acid sequence of ompl1 and lipl41. this was done to design a recombinant fusion protein, which was then expressed to investigate immunogenicity. the selected genes were propagated and cloned as a fusion in a pet32a+ plasmid vector and expressed by escherichia coli strain s (de3) via a heat shock method. the evaluation was conducted using the balb/c mouse as the laboratory animal model. the recombinant lipl41-ompl1 protein was confirmed using the urea purification method and western blot, and its immunogenicity was evaluated by measuring the high humoral immune stimulation and antibody secretion in balb/c mice by the elisa method. the findings demonstrated that the animals that received both the ompl1 and lipl41 proteins exhibited 85% immunogenicity, whereas the control group that did not receive the fusion protein demonstrated only 25% immunogenicity (p<0.001). moreover, no evidence of infection was identified in recipients of the ompl1-lipl41 fusion protein, indicating that this protein is safe for use. the protective effects of immunization with ompl1 and lipl41 were synergistic, as no significant levels of protection were observed in animals immunized with ompl1 or lipl41 alone. in conclusion, this study underscores the potential of a recombinant ompl1 and lipl41 fusion protein as a promising avenue for research in the development of vaccines and elisa diagnostic kits for the prevention and rapid diagnosis of leptospirosis.

سنجش میزان ایمنی زای در پروتئین فیوژن جدید lipl41-ompl1 با استفاده از ادجوانتدر باکتری های بیماری زای لپتوسپیرا با استفاده از ادجوانت در راستای ساخت کیت الایزا و واکسن

لپتوسپیروز یک بیماری است که سلامت انسان و حیوانات را تهدید می کند که توسط لپتوسپیراهای بیماری زا ایجاد می شود. تشخیص زودهنگام لپتوسپایرهای بیماری زا از بسیاری از مشکلات جلوگیری می کند. lipl41-ompl1، یک پروتئین غشای خارجی محافظت شده (omp) از لپتوسپیراهای بیماری زا، با استفاده از نرم افزارهای مختلف برای توالی اسید آمینه ompl1 و lipl41 به باکتری e. coli وارد شد تا یک پروتئین فیوژن نوترکیب طراحی شود و سپس برای بررسی ایمنی زایی بیان شد. ژن‌های انتخاب‌شده به صورت همجوشی در ناقل پلاسمید pet32a+ تکثیر و کلون شدند و توسط اشریشیا کلی پلی‌های s (de3) به روش شوک حرارتی بیان شدند. در مدل حیوانی آزمایشگاهی موش balb/c مورد ارزیابی قرار گرفت. پروتئین نوترکیب lipl41-ompl1 با استفاده از روش خالص سازی اوره و وسترن بلات تایید شد و ایمنی زایی آن با اندازه گیری تحریک ایمنی هومورال بالا و ترشح آنتی بادی در موش balb/c به روش الایزا بررسی شد. نتایج نشان داد که حیواناتی که هر دو پروتئین ompl1 و lipl41 دریافت کردند، 85 درصد ایمنی زایی داشتند، در حالی که گروه کنترل که پروتئین فیوژن دریافت نکردند، فقط 25 درصد ایمنی زایی داشتند (001/0 > p). علاوه بر این، هیچ شواهدی مبنی بر عفونت در گیرندگان پروتئین فیوژن ompl1-lipl41 یافت نشد، که نشان می‌دهد این پروتئین برای استفاده بی‌خطر است. اثرات محافظتی ایمن سازی با ompl1 و lipl41 هم افزایی بود، زیرا سطوح حفاظتی قابل توجهی در حیوانات ایمن شده با ompl1 یا lipl41 به تنهایی مشاهده نشد. به طور کلی، این مطالعه پتانسیل پروتئین فیوژن نوترکیب ompl1 و lipl41 را به عنوان یک استراتژی تحقیقاتی امیدوارکننده در توسعه واکسن‌ها و کیت تشخیصی elisa برای پیشگیری و تشخیص سریع لپتوسپیروز برجسته می‌کند.