first isolation of bacillus licheniformis from bovine mastitis in iran

Bacillus licheniformis is a gram-positive, endospore-forming, saprophytic and facultative anaerobe that is resistant to heat and environmental conditions. this study was the first to isolate and confirm b. licheniformis as a cause of bovine mastitis in iran. in the summer of 2020, 105 samples of mastitic milk were collected from dairy farms around tehran and sent to the microbiology laboratory of the faculty of veterinary medicine at the university of tehran. the bacterial pathogens were identified using selective and differential culture media and confirmed by pcr to contain the toxin synthetase genes lica, licb and licc in mastitic isolates of b. licheniformis. resistance patterns to 19 antibiotics were determined for two isolates of b. licheniformis. staphylococcus aureus and escherichia coli were identified as the most important organisms in the samples. b. licheniformis was isolated from the two samples containing all three genes. both isolates were resistant to streptomycin, trimethoprim-sulfamethoxazole, cefixime, ampicillin, bacitracin, clindamycin, and gentamicin. b. licheniformis was reported for the first time in iran as a cause of bovine mastitis with clinical symptoms. the first isolation of toxin-producing strains of b. licheniformis from mastitic cows in iran raises concerns about the safety of dairy products. in principle, selected strains with toxigenic potential should not be used as feed additives and animal feed. however, whole genome sequencing is proposed to search for genes coding for toxins.

اولین جداسازی باسیلوس لیکنی فورمیس از ورم پستان گاوی در ایران

هدف این تحقیق شناسایی و جداسازی ژن‌های دخیل در تولید انتروتوکسین‌های استافیلوکوکی در سویه‌های جدا شده از شیر گاو فرآوری‌نشده و بررسی تاثیر مایع رویی فاقد سلول پروبیوتیک بیفیدوباکتریوم بیفیدوم بر بیان آنها بود. روش‌های استاندارد بیوشیمیایی و رنگ آمیزی گرم برای جداسازی و شناسایی سویه‌های استافیلوکوک در شیر فرآوری نشده استفاده شد. pcr برای شناسایی سویه های حامل ژن انتروتوکسین استفاده شد. سویه های واجد ژن های هدف در مجاورت مایع رویی بدون سلول b. bifidum (cfs) قرار گرفتند و سطح بیان ژن‌ها با استفاده از real-time pcr اندازه‌گیری شد. با استفاده از توالی یابی 16srdna، رابطه فیلوژنیک سویه های جدا شده مشخص شد. تجزیه و تحلیل نشان داد که باکتری هایی مانند گونه های استافیلوکوکوس در 72 درصد از نمونه ها یافت شد. تست pcr وجود سوپرآنتی ژن های مختلف se شامل sea (16.7%)، sec (11.7%)، sed (8.3%)، see (6.7%) و seb (1.7%) را در سویه های جدا شده نشان داد. b. bifidum cfs فعالیت ضد میکروبی آشکاری در برابر سویه های 24، 51، 54 و 35 گونه های استافیلوکوک داشت و مقادیر mic و mbc برای این سویه های تیمار شده با b. bifidum cfs در محدوده 31.25 میکروگرم بر میلی لیتر تا 125 میکروگرم در میلی لیتر بود. سویه های 51 و 24 به ترتیب با s.aureus atcc 25923 و سویه های 54 و 35 با s.aureus atcc 12600 در یک خوشه قرار گرفتند. rt-pcr نشان داد که پروبیوتیک‌های cfs بیان ژن‌های sea، seb، sec و see را سرکوب می‌کنند (05/0p<). میانگین تغییر سطح بیان ژن برای ژن های sea، seb، sec و sed به ترتیب 1.681-، 1.28-، 1.52- و 0.84- بود. این تحقیق نشان داد که باکتری های پروبیوتیک می توانند تولید انتروتوکسین را با کاهش بیان ژن های انتروتوکسین های استافیلوکوک کاهش دهند.