isolation and characterization of staphylococcus aureus from raw cow’s milk and investigating the effect of bifidobacterium bifidum probiotic cell free supernatant on their enterotoxins genes expression

The present reserach aimed to detect and isolate the genes involved in the staphylococcal enterotoxins (ses) production in strains isolated from unprocessed cow’s milk and to examine the impact of bifidobacterium bifidum probiotic cell-free supernatant (cfs) on their expression. standard techniques were used for isolation and identification of staphylococci strains in unprocessed milk. the pcr was used to identify strains carrying enterotoxin genes. the b. bifidum cfs was applied to strains containing the target genes, and the genes expression levels were quantified using real-time pcr. using 16srdna sequencing, the phylogenic relationship of the isolated strains was determined. analysis revealed that bacteria such as staphylococcus species were found in the 72% of the samples. the pcr test showed the presence of various se superantigens, including sea (16.7%), sec (11.7%), sed (8.3%), see (6.7%), and seb (1.7%) in isolated strains. the b. bifidum cfs had obvious antimicrobial activity against strains 24, 51, 54, and 35 of staphylococcus species, and the minimum inhibitory concentration and minimum bactericidal concentration values for these strains treated with b. bifidum cfs were in the range of 31.25-125 μg/ml. strains 51 and 24 were clustered with s.aureus atcc 25923, and strains 54 and 35 were clustered with s.aureus atcc 12600, respectively. the rt-pcr exhibited that probiotics cfs suppressed the expression of sea, seb, sec, and see genes (p<0.05(. the average fold change for sea, seb, sec, and sed genes was -1.681, -1.28, -1.52, and - 0.84, respectively. the research demonstrated that probiotic bacteria can lower enterotoxin production by downregulating the expression of ses genes.

جداسازی و شناسایی استافیلوکوکوس اورئوس از شیر خام و بررسی اثر سوپرناتانت بدون باکتری بیفیدوباکتریوم بیفیدوم بر بیان ژن های انتروتوکسین در آنها

هدف این تحقیق شناسایی و جداسازی ژن‌های دخیل در تولید انتروتوکسین‌های استافیلوکوکی در سویه‌های جدا شده از شیر گاو فرآوری‌نشده و بررسی تاثیر مایع رویی فاقد سلول پروبیوتیک بیفیدوباکتریوم بیفیدوم بر بیان آنها بود. روش‌های استاندارد بیوشیمیایی و رنگ آمیزی گرم برای جداسازی و شناسایی سویه‌های استافیلوکوک در شیر فرآوری نشده استفاده شد. pcr برای شناسایی سویه های حامل ژن انتروتوکسین استفاده شد. سویه های واجد ژن های هدف در مجاورت مایع رویی بدون سلول b. bifidum (cfs) قرار گرفتند و سطح بیان ژن‌ها با استفاده از real-time pcr اندازه‌گیری شد. با استفاده از توالی یابی 16srdna، رابطه فیلوژنیک سویه های جدا شده مشخص شد. تجزیه و تحلیل نشان داد که باکتری هایی مانند گونه های استافیلوکوکوس در 72 درصد از نمونه ها یافت شد. تست pcr وجود سوپرآنتی ژن های مختلف se شامل sea (16.7%)، sec (11.7%)، sed (8.3%)، see (6.7%) و seb (1.7%) را در سویه های جدا شده نشان داد. b. bifidum cfs فعالیت ضد میکروبی آشکاری در برابر سویه های 24، 51، 54 و 35 گونه های استافیلوکوک داشت و مقادیر mic و mbc برای این سویه های تیمار شده با b. bifidum cfs در محدوده 31.25 میکروگرم بر میلی لیتر تا 125 میکروگرم در میلی لیتر بود. سویه های 51 و 24 به ترتیب با s.aureus atcc 25923 و سویه های 54 و 35 با s.aureus atcc 12600 در یک خوشه قرار گرفتند. rt-pcr نشان داد که پروبیوتیک‌های cfs بیان ژن‌های sea، seb، sec و see را سرکوب می‌کنند (05/0p<). میانگین تغییر سطح بیان ژن برای ژن های sea، seb، sec و sed به ترتیب 1.681-، 1.28-، 1.52- و 0.84- بود. این تحقیق نشان داد که باکتری های پروبیوتیک می توانند تولید انتروتوکسین را با کاهش بیان ژن های انتروتوکسین های استافیلوکوک کاهش دهند.