detection of mycoplasma gallisepticum, isolation, and determination of tylosin susceptibility of isolates from commercial chickens

Mycoplasma gallisepticum (mg) is a contagious avian pathogen that causes financial losses to the poultry industry. isolation of the pathogen is difficult and time-consuming, and therefore, far from a routine method. serological testing methods to detect antibodies resistant to mg are widely used in routine diagnosis. tylosin is a class of macrolide antibiotics tremendously administered in veterinary medicine for the treatment of mycoplasmosis and prophylaxis. this study aimed to detect mg by immunoassay testing, culture, and polymerase chain reaction (pcr) in commercial poultry farms and to investigate the tylosin susceptibility of the isolates. to verify the presence of antibodies resistant to mg, 750 blood samples were randomly collected from 38 broiler farms from 2019 to 2022 in mazandaran and golestan provinces, iran, and rapid slide agglutination (rsa) assay was performed. positive results were analyzed by the enzyme-linked immunosorbent assay (elisa) for further investigation. here, 920 swab samples were collected from 38 non-vaccinated commercial farms for culture, and pcr tests were performed for the isolated strains. the activities of tylosin were tested in vitro against these isolates using the broth microdilution method. the lowest antibiotic concentration that resulted in a color change was considered the minimum inhibitory concentration (mic) value. twenty-four (63.1%) farms were positive in the rsa test, and 21 (55.2%) farms were positive in the elisa test. nine (23.68%) of the farms grew on culture media, and 8 (21.05%) were detected as gallisepticum species by pcr. the geometric mean of mic for tylosin was 5.75 µg/ml, mic50 was 4 µg/ml, and mic90 was 8 µg/ml. the results indicated that commercial farms were infected with mg. considering the ability of mg to spread and the probable use of the rsa test as a rapid and cheap method, it can be argued that elisa and rsa serological tests can be used to find mg in poultry flocks, and the positive result should be confirmed by standard microbiological tests or pcr. it was also found that the isolated parts of mg changed their sensitivity to tylosin, indicating the need for routine testing to optimize treatment dose and efficiency.

شناسایی و جداسازی مایکوپلاسما گالی سپتیکوم و بررسی میزان حساسیت به تایلوزین در جدایه هایه حاصل از مزارع صنعتی

مایکوپلاسما گالی سپتیکوم (mg) به عنوان یک پاتوژن مسری پرندگان، خسارات مالی به صنعت طیور وارد می کند. جداسازی ارگانیسم نسبت به رو ش های معمول دشوار و زمان بر است. بررسی سرولوژیکی برای تشخیص آنتی بادی علیه mg به طور گسترده در تشخیص مورد استفاده قرار میگیرد. تایلوزین از دسته آنتی بیوتیک های خانواده ماکرولید بوده که به طور گسترده در درمان مایکوپلاسموز و پیشگیری استفاده می شود. هدف از این مطالعه شناسایی mg با روش‌های ایمونولوژی، کشت و روش واکنش زنجیره‌ای پلیمراز (pcr) از مرغداری‌های تجاری ایران و بررسی حساسیت تایلوزین در جدایه‌ها می باشد. برای تشخیص وجود آنتی بادی علیه mg ، در مجموع 750 نمونه خون به طور تصادفی از 38 مزرعه مرغ مادر طی سال های 2019 تا 2022 از استان های مازندران و گلستان در ایران جمع آوری گردید و وجود آنتی بادی علیه mg توسط تست آگلوتیناسیون سریع (rsa) و آزمون الایزا مورد بررسی قرار گرفتند. 920 نمونه سواب از 38 مزرعه مرغ مادر غیر واکسینه برای کشت جمع‌آوری گردید و آزمایش pcr بر روی جدایه‌ها انجام شد. حساسیت تایلوزین در شرایط آزمایشگاهی به روش میکرودایلوشن آزمایش شده و کمترین غلظت آنتی‌بیوتیکی که منجر به تغییر رنگ گردید، به عنوان مقدار mic در نظر گرفته شد. 24 مزرعه (1/63%) در تست rsa و21 مزرعه (2/55%) از نظر الایزا مثبت بودند. 9 مزرعه (68/23 درصد) در کشت و8 مزرعه (05/21 درصد) در pcr برای گونه mg مثبت شدند. میانگین mic برای تایلوزین 5.75 میکروگرم بر میلی لیترو mic50 و mic90نیز 4 و 8 میکروگرم بر میلی لیتر بود. نتایج نشان داد که مزارع تجاری آلوده به mg می باشند. با توجه به قابلیت انتشار mg ، سریع و ارزان بودن تست rsa می توان نتیجه گرفت که تست های سرولوژیکی rsa و elisa می توانند به عنوان برنامه های نظارتی برای تشخیص mg در گله های طیور مورد استفاده قرار گیرند والبته نتایج مثبت باید توسط تست های میکروبیولوژیکی یا pcr تایید گردد. همچنین این تحقیق نشان میدهد که جدایه‌های mg حساسیت خود را به تایلوزین تغییر داده و نیاز به کنترل روتین برای بهینه‌سازی دوزها درمانی و کارایی دارو می باشد.